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免疫组化（IHC）
免疫组化（IHC）
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问
免疫组化标本突然大量脱片
沫子大大
大量脱片问题考虑你的试剂浓度是否合适，同时你的载玻片有没有问题，普通的载玻片需要度明胶，也可以直接买黏附性的载玻片，贴的时候不要弄反。
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问
请教-怎么简单理解免疫组化
秋秋欣欣
不是，活检是初步观察细胞有无病变，免疫组化是通过抗原抗体结果的方式进行进一步的定位定量分析
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问
如何分析免疫组化结果及相应的意义？
申东熙老伯
免疫组化通常需要和病理相结合来看，病理取的位置，病理取的器官组织。免疫组化根据阴性和阳性，准确判断是否存在癌症。阴性考虑癌症或者恶性肿瘤的可能性，较低或者阳性考虑恶性肿瘤。
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问
免疫组化荧光强度很弱是怎么回事？
玅940
免疫组化荧光强度很弱可能有多种原因，以下是一些可能的原因：1. 抗体浓度不足：如果使用的抗体浓度太低，可能会导致荧光强度较弱。需要尝试调整抗体浓度。2. 样本处理不当：如果样本处理不当，如过度固定、过度切片或过度染色，可能会破坏蛋白质的结构，导致免疫组化荧光强度较弱。需要优化样本处理方法。3. 光学系统问题：如果光学系统存在问题，如灯泡寿命、荧光滤光片或检测器灵敏度等问题，可能会导致免疫组化荧光强
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问
免疫组化结果
土井挞克树
免疫组化结果一般看染色强度，一般蛋白表达和染色强度成正比。目的蛋白显色代表染色成功
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问
IHC-P,IHC-Fr和IHC-Fl切片固定条件（浓度，温度，时间等）和注意事项有哪些？
丁香粉猪猪
对组织浸蜡时，一般选用56℃~58℃熔点的石蜡，浸蜡温度最好不超过60℃，防止抗原的损失。
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问
只在免疫细胞上表达的蛋白的免疫组化，如何进行评分
huarenqiang5
可使用Image Pro Plus 软件进行统计评分分析。具体方法可以在网上搜索 Image Pro Plus 的操作方法即可，简单上手。
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问
免疫组化阴性对照出现阳性结果，可能的原因有哪些呀
刘胖胖在丁香
洗的时候没有分开洗，洗的时候过长
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问
免疫组化无色片求助
sswei
出现这种现象，有两种可能：1、真阴性结果：整个染色过程没有出现问题，组织或细胞确实不表达与抗体相关的抗原。2、假阴性结果：即此阴性结果不是真实的反映。假阴性结果又可分为两种情况：（1）切片中根本就不包含所预期检查的组织或细胞。出现这种情况，要麽是病理医生选择错了切片或抗体选错了，要麽是技术员选错了蜡块。（2）染色过程中的某一或某些环节出了问题。比如，组织未进行抗原修复，有的组织必须经过抗原修复才能
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问
免疫组化实验过程中，对照组无染色，怎么排查原因啊？
bamboopiggy
对照组找确定的阳参，如果阳参无染色，证明实验过程有问题，首先看抗体的种属是否合适，如果合适，再看试剂是否有问题。
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问
IHC染色
balalaLy
第二个的染色太深了，可以调低一点浓度
2 回答
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问
免疫组化结果如何分析？
赵栋2012
1. 阳性着色细胞计数法。在40×光镜下，随机选择不重叠的10个视野，人工或机器计数阳性着色细胞，每组3~6张不同动物组织切片，然后进行组间比较即可。2.灰密度分析法。通过在不同组别和不同动物组织切片上选择相同区域、相同条件下用image j进行灰密度分析，然后进行统计分析即可。3.评分法。通过在光学显微镜下对组织切片分别按染色程度（0~3分为阴性着色、淡黄色、浅褐色、深褐色）、阳性范围进行评分（
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问
抗体非还原胶显示多种状态，怎么判断活性占比，如何更好分离？
peaceful13
不同条带的区别主要是分子量大小的不同～想要的组分需要了解你的目标抗体的分子量大小通过marker的条带去确定该分子量位置，如果纯化效果不佳～可以考虑一下protein G
5 回答
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问
在什么情况下进行组织抗原修复，抗原修复的条件是什么？
丁香实验
（1）由于组织中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定过程中，发生了蛋白之间交联及醛基的封闭作用，从而失去抗原性。通过抗原修复，使得细胞内抗原决定族重新暴露，提高抗原检测率。（2）修复方法从强到弱一般分为三种，高压修复、微波修复、胰酶修复。修复液也分为若干种（具体的可以查阅相关资料，大量的：中性的、高pH的等）。（3）微波修复，我们一般用6miundefined4次，效果不错。
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问
切片染色后背景太深，不易区分特异性与非特异性着色？
丁香实验
a.也许是抗体本身有问题，因为有很多公司的抗体质量并不好，很容易上背景，可以换一种抗体 试试。b.如果经费不允许换抗体的话，你可降低抗体的浓度，并随时注意观察显色，在能看到信号的情况下尽量降低背景。c.可以换一种封闭液，不同的封闭液对某种来源的抗体来说，会有不同的封闭效果。d.可以在一抗和二抗中加入一定比例的你所检测动物组织的正常血清，这样可以去除一部分非特异性染色。
1 回答
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问
免疫组化结果老是出现阴性结果？
丁香实验
免疫组化出现阴性结果有可能组织本身就没有信号，也有可能是抗体出了问题。你可以找一些阳性组织做一下，以确定是抗体的问题还是组织本身就没有所检测的抗原表达。还有，你可以提高抗体的浓度，或者试一试抗原修复等方法，也许会得到意想不到的结果。
1 回答
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问
内源性过氧化物酶的灭活时间和浓度是什么？
丁香实验
（1）一般3%过氧化氢灭活时间短点，可以10min左右；而0.3%过氧化氢则可以适当延长封闭时间，一般10~30min。（2）用甲醇配置过氧化氢比双蒸水或PBS可能好在保护抗原和固定组织作用，过氧化氢孵育时间过长易引起脱片.（3）现用现配，配好后4度避光保存。
1 回答
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问
DAB显色时间如何把握？
丁香实验
（1）DAB显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗；（2）DAB显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长，需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间；（3）此外，若很短时间就出现背景很深，还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全，需要延长封闭时间；（4）DAB显色时间很长（如超过十几分钟）才出现阳性染色，一方面可能
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