IHC染色

百花香气茶气韵

2022-06-28

最近学习了下免疫组化，发现在加DAB时不知道怎么掌握这个时间的度。下面是染色方法。

然后染了1min的和2min的。差别有点大，因不知道标准，不知道怎么评判好。下面是DAB染1min的：

然后下面是2min的：

想问问大家，是哪个好？我查了相关组织相关蛋白的文献，他们是染2到3min，有的甚至5min。我的一抗浓度是200倍，二抗是100倍。请问大家觉得哪个颜色比较合适？可以评价一下。

Eason老歌迷

2022-06-28

有帮助

你说你掌握不好DAB的时间长短，其实DAB显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗。如果DAB显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长。最后想告诉你，DAB显色一定不要超过10min，最好控制在5min之内。

balalaLy

2022-06-28

有帮助

第二个的染色太深了，可以调低一点浓度

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