IHC染色

最近学习了下免疫组化，发现在加DAB时不知道怎么掌握这个时间的度。下面是染色方法。

然后染了1min的和2min的。差别有点大，因不知道标准，不知道怎么评判好。下面是DAB染1min的：

然后下面是2min的：

想问问大家，是哪个好？我查了相关组织相关蛋白的文献，他们是染2到3min，有的甚至5min。我的一抗浓度是200倍，二抗是100倍。请问大家觉得哪个颜色比较合适？可以评价一下。