免疫组化无色片求助

出现这种现象，有两种可能：

1、真阴性结果：整个染色过程没有出现问题，组织或细胞确实不表达与抗体相关的抗原。

2、假阴性结果：即此阴性结果不是真实的反映。

假阴性结果又可分为两种情况：

（1）切片中根本就不包含所预期检查的组织或细胞。出现这种情况，要麽是病理医生选择错了切片或抗体选错了，要麽是技术员选错了蜡块。（2）染色过程中的某一或某些环节出了问题。比如，组织未进行抗原修复，有的组织必须经过抗原修复才能检测抗原表达；或选用了只能用于冰冻组织而不能用于石蜡包埋组织的抗体；或一抗失效，虽然抗体失效在理论上是一个逐渐的过，但偶尔也遇到突然失效的情况，抗体长期不用和/或已超过有效期是主要的原因。也可见于染色过程中漏掉了某一环节，如忘记加二抗或三抗，或用了两次二抗而缺少了三抗，或配制DAB时少了过氧化氢。

以下是几个可能的原因：

试剂质量问题：即使使用相同的试剂，也可能由于试剂质量问题而导致实验失败。尝试更换不同厂家的试剂或者重新制备试剂，以确保试剂的质量。

抗体问题：抗体可能会出现批次差异或者降解问题，尤其是长期储存或者频繁冻融的抗体。尝试使用不同批次的抗体或者更换抗体。

组织处理问题：组织固定、切片和染色的过程中可能出现问题，例如固定时间不够、切片厚度不一致或者染色时间过长等。检查组织处理的各个环节，尝试对处理过程进行优化。

实验条件问题：免疫组化实验的成功与否还受到实验条件的影响，例如温度、湿度、pH值等。检查实验室的实验条件是否发生了变化，并进行必要的调整。

操作者技术问题：免疫组化实验需要熟练的技术操作，如果操作者技术水平不够或者操作不规范，可能会导致实验失败。建议参加一些技术培训或者向有经验的同事请教，以提高技术水平。

抗体是否变质了，一般最容易出问题的就是抗体