内皮细胞Cd31免疫组化染色

石蜡切片脱蜡至水。

3%H2O2室温孵育5~10 分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。

蒸馏水冲洗，PBS 浸泡5 分钟，(如需采用抗原修复，可在此步后进行)。

5~10％正常山羊血清（PBS 稀释）封闭，室温孵育10 分钟。倾去血清，勿洗，滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37℃孵育1~2 小时或4℃过夜。

PBS 冲洗，5 分钟×3 次。

滴加适当比例稀释的生物素标记二抗（1%BSA-PBS 稀释），37℃孵育10~30 分钟；或滴加第二代生物素标记二抗工作液，37℃或室温孵育10~30 分钟。

PBS 冲洗，5 分钟×3 次。

滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素（PBS 稀释），37℃孵育10~30 分钟；或第二代辣根酶标记链霉卵白素工作液，37℃或室温孵育10~30 分钟。

PBS 冲洗，5 分钟×3 次。

显色剂显色（DAB 或AEC）。

自来水充分冲洗，复染，封片。

冰冻切片免疫组化染色步骤

冰冻切片4~8m，室温放置30 分钟后，入4℃丙酮固定10 分钟，PBS 洗，5 分钟×3。用3％过氧化氢孵育5~10 分钟，消除内源性过氧化物酶的活性。

PBS 洗，5 分钟×2次即可。

拿去，细节可参考自己买的抗体说明书