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shRNA 设计

设计短发夹RNA

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设计性实验

通过创造性设计一种机能性动物实验（包括动物的病理模型），在一定的实验条件和范围内，完成从实验设计到亲自动手操作全过程。在实验过程中，观察实验动物的各种机能与代谢变化，分析和掌握其发生的主要原因和机制。

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设计法

一、立题以实验小组为单位，根据已学的基础或近期将要学的知识，并利用图书馆及其Internet 网查阅相关的文献资料，了解国内外研究现状。经过小组集体酝酿、讨论确立一个既有科学性又有一定创新的药理学实验题目。但是，要注意动物实验方案不可过大和脱离现实条件，应强调其可操作性。初步选题后，由带习老师根据设计方案的目的性、科学性、创新性和可行性进行初审，然后与同学一起对实验方案进行论证。二、方案设计的内容与格式每实验小组在立题基础上，认真地按照规定的格式写出动物实验的设计方案。设计性实验方案的内容应

操作方法所属实验：设计性实验

shRNA设计

1. 克隆到shRNA表达载体中的shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环（loop）序列分隔的，组成发夹结构，由pol Ⅲ启动子控制。随后再连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。2. 两个互补的寡核苷酸两端须带有限制性酶切位点。3. Stratagene发现29个寡核苷酸较之原先推荐的23个寡核苷酸可以更有效地抑制目的基因。4. 在启动子下游的酶切位点下方紧连一个C，使插入片段和启动子有一定空间间隔以确保转录的发生。5. ShRNA目的序列的第一个碱基必须是G以确保RNA聚合

操作方法所属实验：shRNA 设计

问shRNA设计

Eason老歌迷

不需要去掉，siRNA序列最后两个碱基TT不需要去掉。shRNA包括两个短反向重复序列，在活体中输送“小干扰RNA”（siRNA）的一种办法是，将siRNA序列作为“shRNA”克隆进质粒载体。

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问有ZFN设计教程吗

实验问答1304 围观

【课题设计】不用补湿实验的临床模型类生信 SCI ，5 大设计要点！

信 SCI 课题设计的要求水涨船高。那么这么一类相对比较好上手的文章，课题设计要注意哪些文章才相对好发表一些呢？第一点：课题设计具有足够的创新性这是最重要的一点。因为这类文章发文已经相当多了，大家选择的数据集如果一样那课题其实重复性非常高，到时审稿人就非常容易 argue 这样的问题： The lack of novelty. A wide variety of prognostic gene signatures for the prognosis of xx cancer

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如何设计qPCR引物

为大家介绍qPCR引物设计的相关原则，并详细讲解靶基因序列检索以及常用引物设计软件，最后和大家分享qPCR引物实验验证，更多干货与你分享！

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密码子的设计实验

迄今为止，基因只是被用来在细菌中表达，因此不知道这种简单的策略是否也能在更高等的植物的转基因中发挥作用。在 CAPITALS 中的软件程序来自 DNALYSIS 软件的 DOS Compugene suite，可以从作者（W.M.B) 处获得运行在 Windows 下的版本。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

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PCR 引物设计及评价实验

本实验主要用于在体外快速扩增特定基因或DNA序列。

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🔥 引物设计原理与方法

一、引物设计原则1.引物长度：PCR 的特异性通过引物长度和退火温度控制，一般 16-24 个碱基。2. G+C 含量：G+C 的含量一般控制在 40-60% 左右。3.碱基随机分布。为避免 PCR 产物的突变，一般不建议 3' 端连续相同的碱基，并且目的片段的某一序列连续多个相同碱基的位置，极容易出现突变。二、实验步骤1.目的片段的获取设计引物取决于待扩增的目的片段。在 NCBI 首页的搜索框的下拉菜单中选择 Gene，再在对话框中输入目的基因的名称；选择对应的来源之后，选择对应需要的亚型

操作方法所属实验：PCR 引物设计及评价实验

PCR引物设计及评价实验

机率大小。选取引物时，宜选用3’端Frq值相对较低的片段。4. 在设计时，可依据图上三种指标的信息选取序列，如果觉得合适，可点击Tm图块上左下角的Upper按钮，选好上游引物，此时该按钮变成红色，表示上游引物已选取好。下游引物的选取步骤基本同上，只是按钮变成Lower。5. 当上下游引物全选好以后，需要对引物进行评价。可以用“Analyse”菜单分析你的引物：比如有无引物二聚体、发卡结构等等。首先检查引物二聚体尤其是3’端二聚体形成的可能性。需要注意的是，引物二聚体有可能是上游或下游引物自身形

操作方法所属实验：PCR 引物设计及评价实验

问sgRNA设计相关

huarenqiang5

病毒基因组在进入宿主细胞之后，可以视为宿主细胞的一部分

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问实验设计

土井挞克树

最好是这样，这样严谨一些，看一下蛋白表达

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如何设计 qPCR 引物

本期为大家介绍 qPCR 引物设计的相关原则，并详细讲解靶基因序列检索以及常用引物设计软件，最后和大家分享 qPCR 引物实验验证，更多干货与你分享！

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siRNA设计指南

Using siRNA for gene silencing is a rapidly evolving tool in molecular biology. There are several methods for preparing siRNA, such as chemical synthesis, in vitro transcription, siRNA expression vectors, and PCR expression cassettes. Irrespective

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药物临床研究的盲法设计

盲法（blinding，masking）是指在药品临床试验中，为避免研究者和（或）受试者因已知道不同试验分组所用药物类型而对有关评价产生影响（偏倚）的一种方法。盲法主要分为单盲试验（Single Blind Trial）、双盲试验（Double Blind Trial）及双盲、双模拟试验（Double Blind，Double Dummy Trial）。

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人造锌指蛋白的设计和合成实验

在 DNA 结合模体中，（Cys)2(His)2 类型的锌指模体具有大的操控潜力。为新的 DNA 结合蛋白设计，锌指模体提供了有吸引力的框架。特别是为产生新的、具有全新的 DNA 结合特性的，如长 DNA 链识别、DNA 弯折和 AT 富集序列识别——人造锌指蛋白。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。

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人造锌指蛋白的设计和合成

本节描述的方法大概包括：( 1 ) 设计的锌指蛋白的表达和纯化。( 2 ) 人工锌指设计技巧。( 3 ) 人工锌指构建步骤。( 4 ) 锌指结构和金属配位的确认。3.1 人工锌指蛋白的表达和纯化设计的人工锌指蛋白的表达和纯化方法在 3.1.1 和 3.1.6 节描述，包括：( 1 ) 表达载体 pEV-3b 的构建；( 2 ) 蛋白质以可溶和不可溶形式表达；( 3 ) 用阳离子交换和凝胶过滤色谱纯化蛋白；( 4 ) 失活结构的再折叠；( 5 ) 锌指结构和金属配位的确认。3.1.1 pEV

操作方法所属实验：人造锌指蛋白的设计和合成实验