人造锌指蛋白的设计和合成实验

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

在 DNA 结合模体中，（Cys)₂(His)₂ 类型的锌指模体具有大的操控潜力。为新的 DNA 结合蛋白设计，锌指模体提供了有吸引力的框架。特别是为产生新的、具有全新的 DNA 结合特性的，如长 DNA 链识别、DNA 弯折和 AT 富集序列识别——人造锌指蛋白。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。

来源：丁香实验

操作方法

人造锌指蛋白的设计和合成

本节描述的方法大概包括： ( 1 ) 设计的锌指蛋白的表达和纯化。 ( 2 ) 人工锌指设计技巧。 ( 3 ) 人工锌指构建步骤。 ( 4 ) 锌指结构和金属配位的确认。 3.1 人工锌指蛋白的表达和纯化设计的人工锌指蛋白的表达和纯化方法在 3.1.1 和 3.1.6 节描述，包括： ( 1 ) 表达载体 pEV-3b 的构建； ( 2 ) 蛋白质以可溶和不可溶形式表达； (