引物设计

在得到蛋白质部分氨基酸序列的基础上通常采用设计简并性或偏性引物，用锚定 PCR 的方法来获得该蛋白质的 cDNA 部分或全长序列。现在许多公司推出的 RACE（rapidly amplication cDNA ends）系统的技术核心便是如此。简并性引物的设计一般遵循以下几个原则：1. 具有高度特异性：根据所得到蛋白质的部分氨基酸序对，在数据库内进行检索，找出较为特异的一段作为设计引物的模板。在互

聚合梅链式反应（polymerase chain reaction）即PCR技术，是一种在体外快速扩增特定基因或DNA 序列的方法，故又称基因的体外扩增法。PCR技术已成为分子生物学研究中使用最多，最广泛的手段之一，而引物设计是PCR技术中至关重要的一环，使用不合适的PCR引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带很弱，等等。现在PCR引物设计大都通过

一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 5X 激酶缓冲液 0.25mol/LTris-HCl,pH9 0.05mol/LMgCl2 0.05mol/L 二硫苏糖醇（DTT) 0.25 mg/ml 牛血清白蛋白（BSA) -20°C 储存 灭菌重蒸水（ddH20) TE 缓冲液，pH8.0 10 mmol/LTris-HCl,pH8.0 1mmol/LEDTA，pH8.0 2.

[图片]