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蛋白质纯化
专题71 内容  510 订阅
蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验
蛋白质组学和结构基因组学需要这种蛋白质提取方法, 它能够允许同时将几百个蛋白质在不同的载体和宿主的组合上进行筛选 (Stevensetal.,2001)。在这种多因素平行筛选 (multiparallelscreen) 中鉴定出来的能够正确折叠的表达水平高的最佳组合被放大到毫克级规模来生产,以便获得纯品进行功能和结构分析。这种高通量(high-throughout,HT) 的蛋白质表达和纯化策略加速了能够在微量和大量规模上高效裂解细胞和提取蛋白质的试剂及仪器的发展和优化。
实验概况收录 1 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章
疏水作用层析在蛋白质纯化中的理论及应用实验
提 下 ,描述了H I C 吸附剂万面的最新技术,包括通常使用的及可购买得到的商业化吸附剂。接 着介绍H I C 吸附剂应用的基本程序,以便为读者用H l c 进行蛋白质纯化提供出发点。作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来自「蛋白质纯化指南
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章
Tau 蛋白操作指南
储存条件:单体, 未经超声处理的原纤维和纤丝: -80ºC; 保质期一年以上超声处理过的原纤维:-80ºC; 8 周冻融循环:最多 2 次冻融循环解冻条件:原纤维和纤丝: 37ºC单体: 置于冰上或 4ºC储存条件 (解冻的蛋白):原纤维和纤丝: 室温. 不要将原纤维和纤丝保存在冰上或者 4ºC; 原纤维和纤丝在 4ºC 下不稳定并会很快降解. 原纤维和纤丝在室温下稳定,在准备实验时可以放在试验台上。单体: 置于冰上或 4ºC. 如果将单体置于室温或者 37ºC 下时间过长可能会开始聚集。混合
操作方法所属实验:α突触核蛋白活体建模及其他活性测试
α 突触核蛋白操作指南
储存条件:单体, 寡聚体, 和未经超声处理的原纤维和纤丝: -80ºC; 保质期一年以上超声处理过的原纤维: -80ºC; 8 周冻融循环:最多 2 次冻融循环解冻条件:原纤维, 寡聚体, 和纤丝: 37ºC单体: 置于冰上或 4ºC储存条件 (解冻的蛋白):原纤维, 寡聚体, 和纤丝: 室温. 不要将原纤维保存在冰上或者 4ºC; 原纤维和纤丝在 4ºC 下不稳定并会很快降解. 原纤维, 寡聚体, 和纤丝在室温下稳定,在准备实验时可以放在试验台上。单体: 置于冰上或 4ºC. 如果将单体置于
操作方法所属实验:α突触核蛋白活体建模及其他活性测试
晓雨知春来
是的,根据自己的文章内容进行填写。
实验问答3 回答1542 围观
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【资源】转帖:蛋白质纯化技术指南

液相即可使液固的相分离,勿需特殊技术处理,不用有机溶剂,无毒性,成相聚合物及盐对生物活性物质有稳定和保护作用。萃取分离选择性好消耗低、易于规模放大的分离生队物活件物质的新技术在聚乙二醇修饰物的聚乙二醇/葡聚糖双水相萃取体系共价作用:主要用于含巯基酶的纯化,通过共价键结合在层析介质上,偶联是可逆的,能还原二硫键的低分子化合物洗脱,如空间位阻,可在含变性剂的缓冲液时吸附,如已含二硫键,则先用还原剂打开。蛋白质纯化的一般原则及方法选择蛋白质纯化技术指南随着分子生物学的发展,越来越多的科研人员熟练

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摇床分类选型指南

入低温及恒温箱中使用。   三维摇床 3D 运动比较轻柔,适用于剪切力敏感、对氧气需求量较低的细胞培养,比如哺乳动物细胞培养,精细的细胞培养、染色和脱色。   摇床选型指南 1、根据样品的最大载重量进行选择 一般摇床都会有最大载重量,可以根据实验中会涉及的样品混匀量进行选择。 2、根据摇床的振幅大小进行选择 20mm 振幅可作为「万能」振幅(适用于 25ml~2L 的培养瓶)。 3、根据振荡方式进行选择 分为圆周摇床、线性摇床、翘板摇床、三维摇床,根据自己的实验需求,选择合适的摇床。

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MACS 细胞分选入门指南
专题52 内容  413 订阅
分离肝脏质膜的 Neville 法实验
本实验介绍分离肝脏质膜的 Neville 法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
亲和层析的操作实验
本实验介绍亲和层析的相关操作。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验
化处理样品方面的应用。改进后的试剂和方法可以不收集细胞,直接从大肠杆菌培养液中提取重组蛋白。(Grabskietal.,2001;2003;StevensandKobs,2004)。传统的蛋白质纯化方法首先需要收集细胞,这一步骤为浓缩细胞并去除其中残余的培养基成分(Burgess,1987;Deutscher,1990;Scopes,1994)。该步骤与一些机械法裂解细胞步骤一样难以自动化和按比例缩小并同时进行多个蛋白质的小量提取。浓缩后的去垢剂为基础的试剂(表 18.1), 如 PopCulture
操作方法所属实验:蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验
疏水作用层析在蛋白质纯化中的理论及应用实验
这些试剂的。每种蛋白质都必须逐个评价,以确定采用适宜的洗脱方法。纯化过程中所用的 H I C 吸附剂也可能影响洗脱方法的有效性。6. 梯度洗脱蛋白质纯化中,梯度洗脱是一种用于筛选不同 H I C 吸附剂的十分有效方法。梯度洗脱 时 ,盐的浓度以设定的体积,从高到低逐渐降低 (线性方式)。初次筛选与蛋白质结合的吸附剂时,盐浓度甚至会降低至0mmol/L ,以便于确定产品洗脱时的盐浓度。典型的梯度洗脱通常以 10 个柱体积洗脱缓冲液作为起始点,收集流出液组分并评价产品的纯度。降低盐浓度的梯度 (进行较大
操作方法所属实验:疏水作用层析在蛋白质纯化中的理论及应用实验
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缓冲液配制指南

Buffer 配方 1.0 mol/L Tris•HCl(pH 6.8) 溶解后,用浓盐酸调 pH 至 6.8,最后用超纯水定容至 250 mL,高温灭菌后室温下保存。 1.5 mol/L Tris•HCl(pH 8.8) 溶解后,用浓盐酸调 pH 至 8.8,最后用超纯水定容至 250mL,高温灭菌后室温下保存。 10% SDS 取 SDS 10g,加蒸馏水至 100 mL, 50 ℃ 水浴下溶解,室温保存。如在长期保存中出现沉淀,水浴溶化后,仍可使用。 10% 过硫酸胺(APS) 取

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蛋白质纯化介质选购指南

一、生物大分子色谱纯化方法的选择思路通常在做纯化前对自己的目标物质特性了解越多对纯化将会越有利,如果不太了解,也可以通过电泳知道目标物质和杂质的情况,找到一种简单的鉴定方法,此外在纯化前必须先建立可靠的活性测定的方法。如果是未知的蛋白,那么通常可以有几种简单的摸索:1.凝胶过滤色谱。这个方法很常用,但是效率不高,对低浓度的样品没有富集作用,上样量小。2.离子交换色谱。此法很常用,但是样品必须没有高浓度的盐。3.疏水色谱。此法较好,它分离效率高,上样量大,特别适合分离盐析沉淀的样品。4.亲和

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专题封面
细胞培养与基因治疗技术指南
专题23 内容  122 订阅
银染实验
本实验介绍凝胶染色银染的过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
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