QIAgene Expression Kit——再也不为重组蛋白的表达效率发愁 据Protein Database的最新数据表明,目前已知的人类蛋白有35,000种(包括splice variants),大约33%的蛋白正处于研究中,但是只有8%的蛋白能够成功表达。统计数据同时显示,目前克隆,表达,纯化的成功率只维持在54%,74%,59%。所以说,在蛋白表达的漫漫征途中,拿不到想要的蛋白是一件非常普遍的事情。举一个例子来说对于目标蛋白不表达或表达量低这个常见问题,需要排除或检查的因素就太多
E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动子序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状态. 在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白(CAP)结合位点.由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达 。 在没有乳糖存在时,lac操纵子(元)处于阻遏
)等过程,而这些过程在癌变细胞中都是有可能发生改变的。 xiayuxue 谢谢 luke751751 首先要考虑蛋白检测方法是否有问题,比如说是否进行了蛋白的定量,是否有和内参的比值。如果一切正常的话,再;考虑mRNA转录和蛋白表达的差异,对很多基因而言,正如楼上说的,基因的转录和表达是两码事,中间受到很多因素的影响。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为
zhubest 我正在克隆一个八百多bp的基因,换了很多载体,表达条件换了不少,可始终不能得到可溶的蛋白表达,哪位大师能够支招,可以提供一些表达条件,谢谢了 freecell 可以尝试真核表达系统,例如杆状病毒系统或者毕赤酵母。 vbvbvbfgiw 先得确定连接转化都成功了吧,换一种裂解细胞的方法试试(溶剂),使你的蛋白溶解。 版主freecell留言: