【求助】始终不能得到可溶的蛋白表达
丁香园论坛
2309
我正在克隆一个八百多bp的基因，换了很多载体，表达条件换了不少，可始终不能得到可溶的蛋白表达，哪位大师能够支招，可以提供一些表达条件，谢谢了
可以尝试真核表达系统，例如杆状病毒系统或者毕赤酵母。
先得确定连接转化都成功了吧，换一种裂解细胞的方法试试（溶剂），使你的蛋白溶解。
版主freecell留言:
您误解楼主的意思了。
您误解楼主的意思了。
谢谢版主啦，不明白为什么包涵体始终不能通过变表达换条件来得到可溶的蛋白（原核表达），会不会有些蛋白疏水性很强，一表达就包裹在一起了，然后无法通过换条件表达得到可溶的蛋白的情况
版主freecell留言:
可以尝试更换其它载体。不要老是在一种载体上浪费时间。
可以尝试更换其它载体。不要老是在一种载体上浪费时间。
谢谢 不过已经换过很多载体了 还是得不到可溶的表达
低温诱导==16摄氏度
换菌株？不要用单纯的BL21（DE3）==貌似有些菌株有助于可溶性表达，具体名字不记得了。
减少诱导的时间？
实在不行，就真核表达吧。。。肿瘤细胞系转染之类。
good luck！
换菌株？不要用单纯的BL21（DE3）==貌似有些菌株有助于可溶性表达，具体名字不记得了。
减少诱导的时间？
实在不行，就真核表达吧。。。肿瘤细胞系转染之类。
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