自噬中可溶性P62和不可溶性P62有什么区别？

首先p62两种状态，都是自噬活性的重要标记蛋白，在自噬过程中，p62蛋白大多同时存在：可溶性和不可溶性；区别在于自噬流活化时，可溶性p62蛋白减少，不可溶性p62无明显改变；自噬流阻断时，可溶性p62蛋白减少，但不可溶性p62明显增加。

检测可溶性和不可溶性p62 的变化及检测LC3B 的转化,是评价自噬流受阻或自噬系统受损的指标。

当自噬流受阻时, 内源性的p62 也会出现不可溶性堆积, 且这种聚集体是Triton X-100 不可溶的。此外p62 还参与了蛋白酶体降解过程, 当蛋白酶体降解系统受阻时p62 含量同样增加。在研究p62 蛋白降解速率时, 应当适当使用蛋白酶体降解系统抑制剂来观察自噬对于p62 蛋白的降解； 构建带有诱导型启动子的EGFP-p62 也可以用来单独评价其蛋白的降解；通过放射性同位素法也能评价p62 蛋白的降解。然而,当自噬流活化时也有可能观察到p62 含量增加的现象,这是由于自噬体和自噬溶酶体数量代偿性增加的原因, 因此不能单独通过p62 的表达来确定自噬活性。

　　 在操作过程中, 通常可同时观察可溶性p62 蛋白、不可溶性p62 蛋白和LC3B-I/II 转化综合判断自噬流状态。若是可溶性p62 蛋白减少, 不可溶性p62无明显改变, 同时LC3B-I 向LC3B-II 转化增加则表明自噬流活化； 若观察到可溶性p62 蛋白减少, 但不可溶性p62 明显增加, 则无论LC3B 是否发生I 型向II 型的转化均代表了自噬流阻断； 即使可溶性p62 蛋白水平降低, 不可溶性p62 无明显改变, 但LC3B 没有发生I 型向II 型的转化, 也不能说明自噬流一定活化。获取不可溶性p62 的方法主要是在常规细胞裂解离心后, 向离心沉淀中加入高浓度尿素或盐酸胍, 使形成包涵体的不可溶性p62 溶解, 随后便可使用常规蛋白质电泳进行检测。