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条结果
综合
实验
方法
问答
文章
问
[求助]电转化
感受态细胞的制备
dxy_2m9ohu3
你好,请问你后面解决电转的问题了吗?
5 回答
1832 围观
问
单标样品
的制备
方法?不同
实验
目的或者目标细胞,单标
的制备
是否有差异?
sswei
不同
实验
目的,单标制备有一点差异。
3 回答
225 围观
问
转化DH5a
实验
,为什么离心后,沉淀呈絮状,是
感受态细胞
破碎了吗?之前都没出现过这种情况😰这种是失败了吗?
Topmicro
如果离心转速没问题即使
感受态细胞
破碎也应该形成沉淀,只是沉淀少一点而已。
1 回答
453 围观
问
液相
实验
中,对照品溶液
的制备
是如何制备的?比如绿原酸标准品,制成每1ml含有多少mg的绿原酸?这些都是根据什么来的?
sswei
需要配制绿原酸标准品溶液,可以按照以下步骤进行:1. 准备所需材料:绿原酸粉末、去离子水、容量瓶、移液管等。2. 称取适量的绿原酸粉末,根据需要的浓度和体积计算出所需的质量。3. 将绿原酸粉末加入容量瓶中,加入适量的去离子水,摇匀溶解。4. 加入足够的去离子水,使溶液体积达到容量瓶的刻度线。5. 用移液管将溶液充分混合,确保溶液均匀。6. 最后,用标准量筒或移液管取出所需的体积,即可得到所需浓度的绿原酸标准品溶液。需要注意的是,在配制绿原酸标准品溶液时,应该严格按照
实验
室的安全操作规程进行
3 回答
620 围观
问
感受态细胞
的转化,摇菌摇太久?
balalaLy
转化后摇菌是为了复苏感受态,一般摇40分钟左右,不过我做一般的转化是不摇的,直接涂板。摇太久会有杂菌或者减低转化效率
4 回答
12885 围观
问
枯草芽孢杆菌
电转
灵枢天问
电转不长菌有很多原因可能是你机器电压没调好所以没转上,也可能是
感受态细胞
状态不好了,或者是质粒抗性和平板不一致
3 回答
1589 围观
问
肺炎链球菌
感受态细胞
用这么方法制备啊,求解答
凌晨三点Dxy
肺炎链球菌
感受态细胞的制备
是一个专业且精细的
实验
操作过程,通常涉及以下几个关键步骤:1. **细菌的培养**:首先,需要从-70℃的冰柜中取出冻存的肺炎链球菌菌株,然后在超净工作台上用无菌操作将菌株接种到LB固体培养基上,进行活化培养。2. **单菌落的挑选**:从活化的菌落中挑选单个菌落,接种到液体培养基中进行培养。3. **培养至适宜密度**:将细菌培养至对数生长期,通常OD600(光学密度在600纳米波长)值达到0.3至0.5之间。4. **低温处理**:将培养好的细菌在低温(如0℃
1 回答
404 围观
问
大肠杆菌
感受态细胞
制备时的CaCl2浓度到底是多少呢?
我是金博士
我们用0.1 mol/L,参照分子克隆的来。用CaCl2·2H2O可以,只要浓度一样就行了。
1 回答
3967 围观
问
求助鉴别
枯草芽孢杆菌
天一湖医者
枯草芽孢杆菌
和金黄色葡萄球菌可以通过菌群的颜色和外形来区分。颜色上
枯草芽孢杆菌
呈现白色或淡黄色,金黄色葡萄球菌颜色为金色或者没有颜色。形状上
枯草芽孢杆菌
为链状排列,金黄色葡萄球菌为葡萄串一样的球形,菌落表面比较光滑。
1 回答
658 围观
问
枯草芽孢杆菌
摇瓶发酵培养时培养基中玉米淀粉的处理方式?
295 围观
问
大肠杆菌转化子有大有小,结果诡异,有何原因?
我是金博士
这情况我遇到过,尤其菌液PCR时候,有的强有的弱,有的带大小还不一样。我没有具体研究过啥愿意,但把大小一样的那个送去测序,一般都是正确的。关于你的这个情况,我分析【我自己的我也分析过】1、可能酶产物碎了一些,这样连进去就有大有小。如果你引物用的是在载体上的,那很可能扩出大小不同的。如果你引物就是在基因上的,这个好解决,你把退火温度逐渐提高,看看是不是那个不同片段就没了。2、有的时候发生了片段自连【这个看起来好像很可笑,但其实我发现只要末端有一个碱基配对,时间长的话,片段是可以连接到一起
1 回答
6022 围观
问
为什么我的ChIP
实验
做出来,结果就是不理想呢? 为得到理想的ChIP结果,怎么优化
实验
条件?
丁香实验
1、 染色质
的制备
:为了获得足量的染色质,我们的样品准备一定要充足。(IP
实验
的损耗较大,为保证
实验
用量,一次准备5×10E7个以上细胞较好)2、 优化交联固定条件:ChIP
实验
成功与否,直接取决于染色质完整性、抗原表位质量和抗体特异性(抗体一定买好的)。因此优化交联固定条件,富集丰度更高。3、 优化染色质片段化条件:要得到理想的ChIP结果,合适长度和浓度的染色质样品至关重要。(推荐的片段化程度为的染色质片段在150-900bp之间)。4、 免疫沉淀优化:在ChIP抗体富集优化
实验
中,使用
1 回答
634 围观
问
请问平板细胞克隆
实验
,一个孔铺多少细胞,如何给药
没有昵称啦
平板克隆形成
实验
方法简单,适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿
实验
成功的关键是细胞悬液
的制备
和接种密度。细胞一定要分散得好,不能有细胞团,接种密度不能过大。数据分析显微镜下观察阳性克隆,即每个克隆>50个细胞,相机拍照,数克隆数(大小约在0.3-1.0 mm)计算克隆形成率,并统计克隆大小
9 回答
6648 围观
问
感受态细胞
转化时,热激时间可以引导入的DNA大小进行调整么?还是在60秒到90秒就可以
龙大人驾到
感受态细胞
转化时,热冲击的时间是非常重要的,它能影响DNA片段的渗透和稳定性,从而影响到细胞转化效率。一般来说,热冲击的时间应该在60秒至90秒之间。这个时间范围内,热冲击可以促进DNA片段的进入细胞,但如果时间过久,则有可能导致DNA片段的降解和稳定性下降,从而对细胞转化效率造成不良影响。此外,DNA的大小也会影响细胞转化效率,较小的DNA片段通常比较容易进入细胞并被稳定地表达。因此,在进行
感受态细胞
转化时,可以根据
实验
需要和DNA文件质量进行调整,以达到最佳的转化效率。
6 回答
2493 围观
问
电转感受态大肠杆菌如何制备,电转流程是什么,其过程需要注意什么细节
sswei
/ L CaCl 2溶液,重悬细菌沉淀,在4°C下以4,000 r / min离心4分钟,然后除去上清液。6.50 ul体积的冰冷的0.1 mol / L CaCl 2溶液,将细菌沉淀重悬在冰浴中3 h-24 h,即大肠杆菌
感受态细胞
。大肠杆菌感受态
的制备
注意事项,具体有以下几个方面:第一、在整个
实验
操作的过程当中,所使用的试管、枪头、离心管、量液器等器皿及用具都要在无菌的条件下进行,要求在高压条件下灭菌处理;第二、在
实验
过程中,注意所有应用的试剂、DNA酶都不能与其他的试剂相混淆,防止互相
3 回答
3105 围观
问
膜片钳记录不出来电流有些什么原因呢
loveliufudan
信号。确保蛋白质样品
的制备
和处理方法正确,并保持其在适当的条件下。4.
实验
条件和参数设置:膜片钳
实验
需要正确设置各种参数,包括温度、电压、滤波器等。确保
实验
条件和参数设置正确并适应所研究的膜蛋白特性是必要的。
1 回答
575 围观
问
WB
实验
趋势不一致怎么办?
百泰派克-李工
Western Blot(WB)
实验
中趋势不一致通常指的是重复
实验
之间结果差异较大。应对这一问题时,主要策略是仔细检查
实验
的各个步骤,以确保一致性和准确性。具体措施包括:1、样品制备:确保样品的蛋白质浓度一致。使用蛋白酶抑制剂以防止蛋白质降解。确保样品在
实验
过程中的处理方式一致。2、电泳条件:确保凝胶
的制备
和电泳条件一致(如电压、时间)。3、蛋白质加载量:确保每次
实验
加载到凝胶中的蛋白量相同。4、封闭和抗体孵育:使用足够的封闭剂,确保封闭效果。检查一抗和二抗的稀释度是否适当。确保抗体
1 回答
1075 围观
问
我的菌落 PCR 一直做不出来,一直没有找到原因,希望大神帮忙给点思路~
我是金博士
这里的问题很多:1、连接后有没有跑过条带,是不是已经连上了?2、如果连接产物,跑电泳有条带,再转化后没有条带,说明转化有问题,培养时间多长?Amp抗性筛选,容易出现卫星菌落,严格控制时间在12-16h,尽量多挑几个菌落PCR。3、诱导不出,是很正常的,需要摸索最佳诱导条件,可以参考文献报道的诱导条件,然后摸索。比如改进诱导剂浓度,温度梯度,诱导时间等。
1 回答
5498 围观
问
条件培养基
的制备
过程中的坑!
bamboopiggy
1000rpm,10min或者是3000rpm,5min就可以。)后0.22um滤器过滤,这些的目的都是去除培养基中的细胞。不需要测定营养物质的消耗,条件培养基,主要是收集细胞分泌的促增殖的物质,来促进细胞增殖的。
2 回答
2347 围观
问
大鼠胶原诱导类风湿关节炎模型如何造?
loveliufudan
首先,胶原诱导失败可能是由于多种因素导致的,如动物模型的品系和性别,胶原
的制备
和质量,注射的剂量和方法等。因此,您需要仔细检查
实验
过程中的每一个步骤,尤其是制备和注射胶原的步骤,确保每一步都符合标准操作规程。其次,您可以尝试使用其他类型的抗原来诱导关节炎,如蛋白质或细胞提取物,或者使用其他的动物模型或品系。此外,您还可以尝试改变注射的剂量和方法,或者采用其他的
实验
操作,如局部创伤或骨髓刺激等。
4 回答
333 围观
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