小熊小熊111
以前记录出来过TRPV1电流,是CHO瞬转的TRPV1,可是最近扎不出来电流,封接能上吉欧,甚至上5吉欧左右,我猜想可能会有两个原因,一是PH值校准时出现了问题,导致PH值没有到7.4,二是可能是质粒变性了?有没有膜片钳大佬能解答一下
loveliufudan
以下是几个可能的原因:
1. pH值校准问题:pH值的校准对于膜片钳实验非常重要。如果pH值未正确校准或达到所需的水平(例如7.4),可能会影响膜片的性质和膜蛋白的功能,从而导致无法记录到电流信号。确保正确校准pH值并使用合适的缓冲液是非常重要的。
2. 膜片质量和清洁度:膜片的质量和清洁度对于成功记录电流信号至关重要。确保膜片没有破损、没有杂质以及正确的封接是非常重要的。
3. 蛋白质的状态和稳定性:膜蛋白的状态和稳定性可能会影响电流的记录。如果蛋白质结构发生变化、失活或变性,可能会导致无法记录到电流信号。确保蛋白质样品的制备和处理方法正确,并保持其在适当的条件下。
4. 实验条件和参数设置:膜片钳实验需要正确设置各种参数,包括温度、电压、滤波器等。确保实验条件和参数设置正确并适应所研究的膜蛋白特性是必要的。
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