dxy_31r0tfr4
最近做大鼠类风湿关节炎,胶原诱导总是失败?求分享成功案例。
loveliufudan
首先,胶原诱导失败可能是由于多种因素导致的,如动物模型的品系和性别,胶原的制备和质量,注射的剂量和方法等。因此,您需要仔细检查实验过程中的每一个步骤,尤其是制备和注射胶原的步骤,确保每一步都符合标准操作规程。
其次,您可以尝试使用其他类型的抗原来诱导关节炎,如蛋白质或细胞提取物,或者使用其他的动物模型或品系。此外,您还可以尝试改变注射的剂量和方法,或者采用其他的实验操作,如局部创伤或骨髓刺激等。
sswei
将Ⅱ型胶原(是一种与免疫系统隔绝的蛋白质,大量存在于关节软骨中)溶于0.1mol/L的醋酸中,在4℃下搅拌充分溶解,浓度为2g/L,置4℃冰箱过夜,再将灭活卡介苗(BCG)置于液体石蜡中,配成2g/L的完全弗氏佐剂,将二者等体积混合、乳化,制成Ⅱ型胶原乳剂。将该乳剂于小鼠的尾根部皮内注射0.1ml致炎,第21日腹腔注射乳剂0.1ml作为激发注射。
首次免疫注射后,可在皮内注射部位形成多处小溃疡,此为局部炎症刺激反应,一般1周左右可自行结痂愈合;关节炎体征:致炎后24d,小鼠出现关节肿胀,先两个后足,然后蔓延到前足和尾部,并日渐加重,36d达高峰;用足爪仪测足爪变化,再致炎28d,足爪明显大于正常对照组。在发病过程中,动物的毛色失去光泽,轻微脱毛,体重减轻,伴有耳及尾部的炎症病灶。肉眼可见单个或多个关节红、肿,动物行动不便;光镜下,早期滑膜组织有中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞浸润,继之滑膜细胞增生、排列紊乱,纤维素渗出,胶原纤维沉着,纤维素样坏死,即滑膜炎表现;电镜下,滑膜细胞线粒体减少,溶酶体增多,细胞间隙增大;关节腔内渗出液细菌培养阴性,提示CIA为非感染性炎症。CIA的骨质破坏与破骨细胞的异常表达关系密切,利用组织形态测定CIA小鼠近端胫骨及腰椎骨的骨质丢失,发现早期有大量破骨细胞和暂时性骨质构建,致炎后4周,在近端胫骨接近关节炎症部位,破骨细胞及骨小梁的数量比对照组增加4倍,腰椎部位未显示关节炎症状,破骨细胞募集较晚,随着时间的推进,在近端胫骨和腰椎有骨的吸收。
毛利小五郎的徒弟
Ⅱ型胶原诱导的关节炎(typeⅡ collagen-induced arthritis,CIA)模型是一种人类类风湿关节炎的常见病理模型。建立CIA大鼠模型的方法如下:10mg鸡Ⅱ型胶原溶解于5ml 0.1mol/L乙酸中混合均匀,溶液为2mg/ml。然后将溶液储存在4℃保存一晚上。第二天,用2ml注射器,抽取0.7ml胶原,再用另一支2ml注射器吸入0.7ml不完全弗氏液佐剂。在冰袋上,同时从两个注射器中取下针头,连接到三通上;关闭一个接口,允许两个注射器相通。使用注射器在冰袋上来回推30分钟,使两个注射器中的溶液充分混合成乳白色。如果生成的乳液无法分散在清水中时,1 mg/ml胶原乳液的制备可认为完成。在大鼠尾根,胶原乳剂(0.1ml)在2-3 cm的距离处皮下注射。在初次免疫后一周,将相同剂量的胶原乳液注射到这些大鼠身上相同的区域。
huarenqiang5
【建模方法】 将Ⅱ型胶原(是一种与免疫系统隔绝的蛋白质,大量存在于关节软骨中)溶于0.1mol/L的醋酸中,在4℃下搅拌充分溶解,浓度为2g/L,置4℃冰箱过夜,再将灭活卡介苗(BCG)置于液体石蜡中,配成2g/L的完全弗氏佐剂,将二者等体积混合、乳化,制成Ⅱ型胶原乳剂。将该乳剂于小鼠的尾根部皮内注射0.1ml致炎,第21日腹腔注射乳剂0.1ml作为激发注射。