大鼠胶原诱导类风湿关节炎模型如何造？

首先，胶原诱导失败可能是由于多种因素导致的，如动物模型的品系和性别，胶原的制备和质量，注射的剂量和方法等。因此，您需要仔细检查实验过程中的每一个步骤，尤其是制备和注射胶原的步骤，确保每一步都符合标准操作规程。

其次，您可以尝试使用其他类型的抗原来诱导关节炎，如蛋白质或细胞提取物，或者使用其他的动物模型或品系。此外，您还可以尝试改变注射的剂量和方法，或者采用其他的实验操作，如局部创伤或骨髓刺激等。

将Ⅱ型胶原(是一种与免疫系统隔绝的蛋白质，大量存在于关节软骨中)溶于0.1mol/L的醋酸中，在4℃下搅拌充分溶解，浓度为2g/L，置4℃冰箱过夜，再将灭活卡介苗(BCG)置于液体石蜡中，配成2g/L的完全弗氏佐剂，将二者等体积混合、乳化，制成Ⅱ型胶原乳剂。将该乳剂于小鼠的尾根部皮内注射0.1ml致炎，第21日腹腔注射乳剂0.1ml作为激发注射。

首次免疫注射后，可在皮内注射部位形成多处小溃疡，此为局部炎症刺激反应，一般1周左右可自行结痂愈合；关节炎体征：致炎后24d，小鼠出现关节肿胀，先两个后足，然后蔓延到前足和尾部，并日渐加重，36d达高峰；用足爪仪测足爪变化，再致炎28d，足爪明显大于正常对照组。在发病过程中，动物的毛色失去光泽，轻微脱毛，体重减轻，伴有耳及尾部的炎症病灶。肉眼可见单个或多个关节红、肿，动物行动不便；光镜下，早期滑膜组织有中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞浸润，继之滑膜细胞增生、排列紊乱，纤维素渗出，胶原纤维沉着，纤维素样坏死，即滑膜炎表现；电镜下，滑膜细胞线粒体减少，溶酶体增多，细胞间隙增大；关节腔内渗出液细菌培养阴性，提示CIA为非感染性炎症。CIA的骨质破坏与破骨细胞的异常表达关系密切，利用组织形态测定CIA小鼠近端胫骨及腰椎骨的骨质丢失，发现早期有大量破骨细胞和暂时性骨质构建，致炎后4周，在近端胫骨接近关节炎症部位，破骨细胞及骨小梁的数量比对照组增加4倍，腰椎部位未显示关节炎症状，破骨细胞募集较晚，随着时间的推进，在近端胫骨和腰椎有骨的吸收。

Ⅱ型胶原诱导的关节炎(typeⅡ collagen-induced arthritis,CIA)模型是一种人类类风湿关节炎的常见病理模型。建立CIA大鼠模型的方法如下：10mg鸡Ⅱ型胶原溶解于5ml 0.1mol/L乙酸中混合均匀，溶液为2mg/ml。然后将溶液储存在4℃保存一晚上。第二天，用2ml注射器，抽取0.7ml胶原，再用另一支2ml注射器吸入0.7ml不完全弗氏液佐剂。在冰袋上，同时从两个注射器中取下针头，连接到三通上；关闭一个接口，允许两个注射器相通。使用注射器在冰袋上来回推30分钟，使两个注射器中的溶液充分混合成乳白色。如果生成的乳液无法分散在清水中时，1 mg/ml胶原乳液的制备可认为完成。在大鼠尾根，胶原乳剂（0.1ml）在2-3 cm的距离处皮下注射。在初次免疫后一周，将相同剂量的胶原乳液注射到这些大鼠身上相同的区域。

【建模方法】 将Ⅱ型胶原(是一种与免疫系统隔绝的蛋白质，大量存在于关节软骨中)溶于0.1mol/L的醋酸中，在4℃下搅拌充分溶解，浓度为2g/L，置4℃冰箱过夜，再将灭活卡介苗(BCG)置于液体石蜡中，配成2g/L的完全弗氏佐剂，将二者等体积混合、乳化，制成Ⅱ型胶原乳剂。将该乳剂于小鼠的尾根部皮内注射0.1ml致炎，第21日腹腔注射乳剂0.1ml作为激发注射。