WB实验趋势不一致怎么办？

Western Blot（WB）实验中趋势不一致通常指的是重复实验之间结果差异较大。应对这一问题时，主要策略是仔细检查实验的各个步骤，以确保一致性和准确性。具体措施包括：

1、样品制备：

确保样品的蛋白质浓度一致。使用蛋白酶抑制剂以防止蛋白质降解。确保样品在实验过程中的处理方式一致。

2、电泳条件：

确保凝胶的制备和电泳条件一致（如电压、时间）。

3、蛋白质加载量：

确保每次实验加载到凝胶中的蛋白量相同。

4、封闭和抗体孵育：

使用足够的封闭剂，确保封闭效果。检查一抗和二抗的稀释度是否适当。确保抗体孵育时间和温度一致。

5、检测和成像：

确保使用相同的检测方法和曝光时间，以获得可比较的结果。

6、实验记录和复核：

详细记录所有实验条件和步骤，以便于发现可能的不一致之处。

7、排除设备故障或试剂变质：

定期检查实验设备（如电泳仪、转膜设备）是否正常工作。确保所有试剂和消耗品是在有效期内且储存条件适当。