WB实验操作视频

免疫印迹又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中 的某种蛋白的方法。其基本流程是先将待检测样品溶解于含有去污剂和还原剂的溶液中，经过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离各组分，然后通过印迹技术把分离样品几乎原位、定量转 移到 NC 膜上。随后用特异抗体与 NC 膜上的靶抗原反应，结合上的抗体可用与辣根过氧化物 酶或碱性磷酸酶偶联的抗免疫球蛋白进行反应，最后通过与酶的底物发生显色反应来做检测。 由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白 分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。结 合化学发光检测，可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。