小椁呀呀呀
想问问大家蛋白跑出来是这样子是因为抗体浓度太高了吗?蛋白是P62 就是呈现出很多条带 但是每条都不清晰???这是为什么啊??求解!!!
Eason老歌迷
你这可能是非特异性条带,可以选一个特异性比较高的抗体,或者是你封闭时间久一点。
小椁呀呀呀
嗷嗷好滴吧 我们试着封闭久一点试试!
申东熙老伯
抗体浓度是多少呀?你这个条带这样浅,更应该是抗体浓度低了,也可能抗体浓度没有问题,但是上样量少了。
小椁呀呀呀
抗体浓度我们本来配的是1:800 因为那个抗体的说明书上做wb的抗体浓度是1:500-1:1000 我们就选了一个中间值1:800 但是后面跑了一次浓度又太高了背景全是黑的 我们就再稀释了一次 就稀释了1:1000了
whilt-shirt
这个有可能是上样量过低,抗体浓度过高导致的
小椁呀呀呀
上样量都是确定好了的吧?我们加到都是10ul耶 抗体浓度本来太高了然后我们又稀释了的呀