western blot 分离胶对应的浓度与蛋白大小（KD）的关系是怎么样的呢

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Western blot中，分离胶的浓度与蛋白质大小（kDa）的关系基本上是：分离胶的浓度越高，其分离的蛋白质分子量范围越小。具体来说：

1.低浓度的胶（比如5%）更适合分离大分子量的蛋白质（比如大于200 kDa）。

2.中等浓度的胶（比如10%-12%）通常用于分离中等分子量范围的蛋白质（比如25-200 kDa）。

3.高浓度的胶（比如15%或更高）适合于分离小分子量的蛋白质（比如小于25 kDa）。

选择合适的胶浓度对于有效地分离不同分子量的蛋白质至关重要。

目标蛋白大小做好在分离胶的中部，这样得到的条带才能好看，易于后期进行相关分析的。

western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。

不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。

而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶，所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下。

所以western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。

具体可以参考下表

有两种情况，一是蛋白分子量小，凝胶浓度小（比如20kd以下的蛋白，凝胶浓度用10%），就会因为孔径大，蛋白小，而对蛋白的截留能力越小，蛋白就会越容易迁移，就会容易出现小分子蛋白从凝胶中跑出去的情况，而且分离效果也会很差；二是蛋白分子量大而分离胶浓度也大，就会因为蛋白比凝胶孔径大，从而卡在孔道里跑不动，蛋白都卡在同一个位置，跑不下去，蛋白就分不开了。

作者：BOSTER

链接：https://www.zhihu.com/question/525064488/answer/2415951721

来源：知乎

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胶浓度越大跑的分子量越小，反之跑大分子得用浓度小的胶