【求助】western blot
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请教大家,以下是本人跑的WB结果图。本人不明白那一团黑的是什么回事,跟右边那个条带都不是一回事儿?如果是表达太强的话,那也最起码应该是很黑很粗类似线样的条带吧,可是我跑出来的结果就是整个泳道都是黑的。用同样的蛋白重跑了一次还是这个结果,请问是不是我的细胞或者是蛋白有问题呢?或者是还可能有什么其他的原因呢?多多指教,不胜感激!
是不是忘记煮蛋白了?
没有,所有蛋白都是统一变性的。
换loading buffer试试
loading buffer也换了还是同样的结果。之后又重新提蛋白然后变性再跑还是这样?有一个教授说可能是细胞崩解了,有没有哪位高手知道是什么回事或者是碰到类似的情况呀???求解!!!谢谢~
用别的蛋白做个对照试一下~
右边那个泳道做的是同一种蛋白,没有出现一团黑的现象。郁闷呐!!!求解~
蛋白存放时间太长了,可能需要重新提取。
可是两个泳道用的蛋白是同时提、同时测浓度、同时变性的,而且重新收细胞重做还是这样~
kank \
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