CFS 无细胞蛋白表达与传统的基于大肠杆菌系统的蛋白表达相比,速度快,产量高,无包涵体困扰,对于膜蛋白、毒蛋白等特殊蛋白具有很强的适应性。其超高的表达效率和广泛的模板适应性可以大大加速实验流程,免去多次调试实验参数的困扰,特别适合各类蛋白结构和功能研究的客户使用,尤其适合因疫情导致实验延误的老师尽快赶上预期进度。
细胞表达系统的主要优点是蛋白翻译加工后机制接近体内的天然形式,容易保留生物活性,缺点是很难高通量表达,且建立稳定细胞系的技术难度大,操作繁琐,生产成本高。 无细胞表达系统 和传统的体内表达不同,无细胞表达系统是以细胞裂解液为基础,在试管中进行的蛋白表达。无细胞蛋白表达系统是一个开放系统,不需要依赖活细胞。使用从不同物种的细胞(例如,大肠杆菌、小麦胚芽、塔氏利什曼原虫、兔网织红细胞、昆虫或人类细胞)中提取的生物分子翻译机制,在溶液中对重组蛋白质进行生产的过程。 开放性系统赋予蛋白表达的灵活性,无细胞
重组无细胞抗百日咳疫苗 自20世纪40年代末,全细胞灭活的百日咳疫苗已能供应大批量接种(Kendriek等,1947)。此疫苗在防百日咳发病方面很有效,但存在着严重的不良反应。虽从未证实不良反应是由疫苗本身所引起的,但在70年代导致了接受该疫苗接种率的降低和对新的更安全疫苗需求的高涨。由于百日咳毒素(pertusslstoxin,PT)是百日咳菌的主要毒力因子,有几家机构开发丁含经化学灭活和纯化的百日咳毒素的无细胞百日咳疫苗。但已知用甲醛和戊二醛对百日
流式细胞术是分析细胞或颗粒特征常用的技术:将细胞表面或胞内、核内的抗原标记上荧光抗体,荧光素被激发光激发时产生荧光,从而被检测。 DAPI 即 4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一种可以透过完整的细胞膜,与DNA强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。当 DAPI 与双股 DNA 结合时,在紫外光的激发下,发出蓝光。而红细胞无细胞核(无 DNA),因此不会被 DAPI 染色。 在免疫