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无细胞体系翻译病毒 mRNA
用哺乳动物细胞 S10 抽提物翻译脊髓灰质炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技术。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
整合膜蛋白在单室脂质体中的无细胞翻译实验
膜蛋白提供了相应的分子机制,使得有用的分子能够可控地进入细胞,并且允许细胞内的产物输出到胞外。细胞膜上的酶合成了组成细胞膜的分子 (如饱和与不饱和脂肪酸、憐脂、甘油酯、鞘脂、甾醇、聚异戊二烯)。细胞膜上的酶复合物负责电子传递, 产生电化学梯度 』 而精细的细胞膜 A T P 酶马达利用这些梯度产生 A T P 。膜蛋白还能收集光, 提供变构的受体而将外部分子与细胞膜的结合信息通过信号级联转导为细胞反应; 在胚胎干细胞分化组装为更复杂的组织时提供必需的表面接触; 帮助激发针对病原体感染的抗原反应
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
无细胞体系翻译病毒 mRNA
的无 RNase 的 DNaseI 于 37℃ 温育 15 min3) 加入 1/2 体积的 7.5mol/L LiCl,一 20℃ 放置 30 min。4)10000 g 离心 10 min,用 80% 乙醇洗 RNA 沉淀,风干沉淀并溶于 0.5 ml 无 RNase的 TE(终浓度 1ug/ul)。通常 1ug 模板 DNA 对转录 5o〜100ugRNA,按 10〜20ul 分装并储存于-80℃5) 通过琼脂糖凝胶电泳分析 RNA 产物大小,分光光度计分析产量。(三)无细胞翻译储存于一 8O℃
操作方法所属实验:外无细胞体系翻译病毒 mRNA
通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验
细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。
操作方法所属实验:通过高等真核生物无细胞提取物分析 mRNA 的降解实验
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CFS 无细胞蛋白表达体系的原理、优点和应用

CFS 无细胞蛋白表达与传统的基于大肠杆菌系统的蛋白表达相比,速度快,产量高,无包涵体困扰,对于膜蛋白、毒蛋白等特殊蛋白具有很强的适应性。其超高的表达效率和广泛的模板适应性可以大大加速实验流程,免去多次调试实验参数的困扰,特别适合各类蛋白结构和功能研究的客户使用,尤其适合因疫情导致实验延误的老师尽快赶上预期进度。

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种草一款无细胞蛋白质表达试剂盒

细胞表达系统的主要优点是蛋白翻译加工后机制接近体内的天然形式,容易保留生物活性,缺点是很难高通量表达,且建立稳定细胞系的技术难度大,操作繁琐,生产成本高。  无细胞表达系统 和传统的体内表达不同,无细胞表达系统是以细胞裂解液为基础,在试管中进行的蛋白表达。无细胞蛋白表达系统是一个开放系统,不需要依赖活细胞。使用从不同物种的细胞(例如,大肠杆菌、小麦胚芽、塔氏利什曼原虫、兔网织红细胞、昆虫或人类细胞)中提取的生物分子翻译机制,在溶液中对重组蛋白质进行生产的过程。 开放性系统赋予蛋白表达的灵活性,无细胞

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通过高等真核生物无细胞提取物分析 mRNA 的降解实验
细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
mRNA 3' 末端体外加工
体外实验有两种策略;一是将 包 含 Po ly( A) 位点目标基因的质粒与无细胞提取物共同孵育,以 使 RNA 聚 合 酶 II 转录目标基因,并对最初的转录进行加工;另一种策略是利用标准的噬菌体聚合酶驱动系统合 成 前 mRNA,然后与无细胞提取物共同孵 育 。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
整合膜蛋白在单室脂质体中的无细胞翻译实验
,或者放 人 1 0 0 % 乙醇以备下次使用。(11) 37°C 过夜孵育板子。质粒 D N A 的纯化所有用于体外转录和翻译的试剂必须是无 R N A 酶的。因此,所有用于制备无细胞反应的玻璃器皿一定要在 18 〇 °C 烘 烤 3 h 以 去 除 R N A 酶 。此 外 ,要戴手套,并在处理试剂时避免说话和打喷嚏以防止手上和唾液中的 R N A 酶污染。除非另有说明,所有缓冲液必须用〇.2 um 滤器过滤除菌, 保存在一 20°C 。另外,除非另有说明,用 18 MΩ的水 (Milli-Q
操作方法所属实验:整合膜蛋白在单室脂质体中的无细胞翻译实验
黏菌门鉴定
黏菌门黏菌是介于动物和真菌之间的生物类群。在生长期或营养期为裸露的无细胞壁的原生质团,称变形体。构造、运动等类似变形虫。繁殖时产生具纤维素细胞壁的孢子,类似植物孢子。发网菌属用解剖针挑取,制成水装片,显微镜下观察。
操作方法所属实验:黏菌门、真菌门鉴定
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重组无细胞抗百日咳疫苗

重组无细胞抗百日咳疫苗       自20世纪40年代末,全细胞灭活的百日咳疫苗已能供应大批量接种(Kendriek等,1947)。此疫苗在防百日咳发病方面很有效,但存在着严重的不良反应。虽从未证实不良反应是由疫苗本身所引起的,但在70年代导致了接受该疫苗接种率的降低和对新的更安全疫苗需求的高涨。由于百日咳毒素(pertusslstoxin,PT)是百日咳菌的主要毒力因子,有几家机构开发丁含经化学灭活和纯化的百日咳毒素的无细胞百日咳疫苗。但已知用甲醛和戊二醛对百日

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这么有趣的流式和免疫学漫画,真的忍不住分享给你!

流式细胞术是分析细胞或颗粒特征常用的技术:将细胞表面或胞内、核内的抗原标记上荧光抗体,荧光素被激发光激发时产生荧光,从而被检测。 DAPI 即 4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一种可以透过完整的细胞膜,与DNA强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。当 DAPI 与双股 DNA 结合时,在紫外光的激发下,发出蓝光。而红细胞无细胞核(无 DNA),因此不会被 DAPI 染色。 在免疫

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cDNA 合成技术
通过体外无细胞系统翻译找出目的基因mRNA以后,变可进行cDNA第一链的合成,其步骤如本文所介绍.
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
mRNA 在麦胚提取物中的翻译
麦胚提取物体外翻译系统可用于病毒和真核细胞中 mRNA 在异种无细胞体系中的有效的翻译
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
🔥 细胞毒性分析(CCK-8 法)
1、根据具体细胞类型确定其在 96 孔板种植密度,以对照组细胞密度至检测时达到 70%-90% 为参照,每组设置 3-6 个复孔,孔板边缘空不用,加入与培养基等体积的无菌 PBS 溶液;2. 每孔加入培养基体积 1/10 的CCK-8 溶液。若起始的培养体积为 200 微升,则需加入 20 微升 CCK-8 溶液,其它情况以此类推。同时以加了相同体积细胞培养液和 CCK-8 溶液但没有细胞的孔作为空白对照。若所用药物会干扰检测结果,则选加入等体积细胞培养液、药物和 CCK-8 溶液但无细胞的孔
操作方法所属实验:细胞毒性分析
免疫复合物的体外激酶活性测定
体外蛋白激酶活性测定 (in vitro kinase assay) 实际上是在无细胞体系中 利用 γ-32 P-ATP 作为磷酸基团供体进行的蛋白质磷酸化分析。
操作方法所属实验:放射性核素示踪法用于蛋白质磷酸化分析
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