种草一款无细胞蛋白质表达试剂盒

以大肠杆菌为代表的原核蛋白表达系统是常用的表达系统，具有表达量高和成本低的优点，但是蛋白质翻译后缺乏加工机制（比如形成二硫键和蛋白糖基化等），且很难保留生物活性。

以甲醇毕赤酵母为代表的酵母蛋白表达系统，具有表达量高，可诱导，糖基化机制接近真核生物等优点，但是部分蛋白产品易降解，表达量不可控。

哺乳动物细胞和昆虫细胞表达系统的主要优点是蛋白翻译加工后机制接近体内的天然形式，容易保留生物活性，缺点是很难高通量表达，且建立稳定细胞系的技术难度大，操作繁琐，生产成本高。
 无细胞表达系统
和传统的体内表达不同，无细胞表达系统是以细胞裂解液为基础，在试管中进行的蛋白表达。无细胞蛋白表达系统是一个开放系统，不需要依赖活细胞。使用从不同物种的细胞（例如，大肠杆菌、小麦胚芽、塔氏利什曼原虫、兔网织红细胞、昆虫或人类细胞）中提取的生物分子翻译机制，在溶液中对重组蛋白质进行生产的过程。

开放性系统赋予蛋白表达的灵活性，无细胞蛋白表达系统在表达膜蛋白、有毒蛋白、二硫键蛋白、抗体片段等方面具有独特优势。由于可以使用线性模板，利用PCR方法就可以轻松实现在目的基因两侧加入需要的转录和翻译所需的因子，不需要繁琐的载体构建过程。线性模板的使用还可以实现蛋白的高通量合成和筛选。
 

ALiCE® Kit无细胞蛋白质表达试剂盒 (植物细胞裂解液) 

(Sigma货号：AL0103000)

ALiCE®无细胞蛋白质表达试剂盒是一种独创的真核无细胞系统，可利用植物细胞裂解物在批量处理模式下将蛋白质产量提升到前所未有的3mg/mL。ALiCE®的强大之处在于完整的细胞器，可利用活性线粒体提供持续的能量供应。此外，微粒体（内质网重组形成的囊泡）还能够对复杂蛋白质进行折叠和翻译后修饰，包括二硫键和糖基化。

ALiCE® kit components:
• Two expression vectors, pALiCE01 for expression in cytosolic
fraction and pALiCE02 that offers the opportunity to express
protein with post-translational modifications like disulfide bonds.
• ALiCE® Lysate
• Tubes

特点和优势: 

• 高产量：前所未有的 3 mg/mL
• 简易操作：一步法
• 快速: 48小时收获超高产量
• 高灵活性:表达困难蛋白, 抗体、抗原、有毒的蛋白，等.
• 验证:已在超过500种蛋白验证
• 翻译后修饰(e.g. 折叠、二硫键、糖基化 等)
ALiCE® Kit无细胞蛋白质表达试剂盒:

SKU-Pack Size	Price (RMB)
AL0103050 (6 x 50ųl)	6,042.68
AL0103200 (6 x 200ųl)	19, 752.40
AL0103500 (6 x 500ųl)	45,092.65

CFPE700-新一代无细胞蛋白表达试剂盒（小麦胚芽）

新一代无细胞蛋白质表达试剂盒（小麦胚芽）是一种低成本、高灵活性、高产量重组蛋白表达系统，采用便捷的protocol可在一天之内收获高产量的目标蛋白。小麦胚芽无细胞蛋白质表达系统是日本研究所在“人工蛋白工厂”项目中进行全面蛋白表达研究的首选：在研究的总共13364种人类蛋白质中，97.2%的蛋白使用了小麦胚芽无细胞蛋白质表达系统。

与 in vivo蛋白表达系统对比:

	困难蛋白表达	操作时间	Target protein Manipulation
CFPS700	Yes	9 hours	Yes
In vivo 表达系统	No	5 days to 4 weeks	No

与其他无细胞蛋白表达系统相比:

	蛋白质量	产量 (ųg/ ųl)
CFPS700	2nd best choice for eukaryotic targets supported by the most product data showing expression of a variety of protein targets. No glycosylation	2nd highest among eukaryotic and mammalian lysates. Average yield10ųg/110ųl. Lower than E. coli Lysate

CFPS700 试剂盒 – 特点和优势

• 已验证可表达多种原核和真核蛋白，包括有毒蛋白
• 从PCR产物开始-无需克隆和细胞培养
• 不需要优化密码子，即使A/T或G/C高含量的transcripts也适用
• 由于其天然结构和真核生物来源，蛋白溶解度高
• 无动物成分，无血清
• 可线性扩大产量
• 对于膜蛋白不需要添加人工脂质体
• 可诱导形成二硫键
• 低成本，平均每个反应产出10μg蛋白，每个试剂盒提供50个反应

已验证可成功表达：Kinase, Enzyme, Transporter, Receptor and GPCR proteins, from 10kDa to over 220kDa

CFPE700-新一代无细胞蛋白表达试剂盒:
 

SKU- Pack Size	Price (RMB)
CFPS700-1 KT	5,265.18

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目录价	包装规格	目录价（元）	终端折扣价（元）
AL0103050	6x 50 ųl	6,042.68	4,532. 00
ALO103200	6x 200 ųl	19,752.40	14,814.30
AL0103500	6x 500 ųl	45,092.65	33,819.49
CFPS700-1KT	1 kit	5,265.18	3,948.89