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专题封面
PCR 实验基础原理
专题73 内容  1670 订阅
PCR 组装反应
本实验介绍关于PCR 组装反应的过程。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
凝集反应实验
细菌细胞或红细胞等颗粒性抗原与特异性抗体结合后,在有电解质的情况下,会出现肉眼可见的凝集块,称为凝集反应,也叫直接凝集反应。凝集反应可说是经典的血淸学反应,使用历史长,并一直沿用至今,但技术方法有很大的发展与改进,例如,除直接凝集反应外,又有将可溶性抗原吸附到颗粒性载体(如红细胞、白陶土、离子交换树脂和火棉胶颗粒等)表面,然后再与相应抗体结合的间接凝集反应。用红细胞作为载体的间接凝集反应叫间接血凝试验,还有血凝抑制试验、反向间接血凝试验等。来源:《微生物学实验(第三版)》
实验概况收录 2 操作方法 · 3 相关文章
转运反应
1. 将反应混合物加入一在冰上放置的微量离心管中。能量重建系统成分如下:5 mmol/L 磷酸肌酸20 单位/ml 肌酸磷酸激酶0.5 mmol/L ATP0.5 mmol/L GTP2. 滴一滴孵育混合物到一片位于带盖子的湿盒中的封口膜上。将带有通透细胞的盖玻片上多余缓冲液吸去。倒置于孵育液滴上。对所有样品, 重复该步骤。对于悬浮培养细胞,可在一微量离心管中反应,细胞可以通过离心和用新鲜的转运缓冲液重悬浮来清洗。3. 所有样品都放好以后,盖上盒子,在 30℃ 水浴中孵育 30 分钟
操作方法所属实验:转运反应成分的制备实验
Brachet反应
细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量分析。
操作方法所属实验:细胞组分的化学反应实验
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ELISA 中的抗原与抗体的反应

,对某些传染病如甲型肝炎有较高的临床诊断价值。 抗原抗体反应 1. 可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为: Ag+Ab→Ag·Ab 抗体的亲和力(affinity)是抗原抗体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示: K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab] Ag·Ab 的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗体。在抗

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PCR 反应体系的循环参数

1、变性温度和时间: 模板 DNA 和 PCR 产物的变性不充分是 PCR 失败的主要原因。适宜的变性条件是 95℃ 30s 或 97℃15s。变性不完全,DNA 双链会很快复性,因而减少产量。在变性中,温度太高或反应时间过长,会导致酶活性的损失。Taq DNA 聚合酶活性的半寿期:92.5℃为 2h 以上,95℃为 40min,97℃为 5min。 2、复性温度和时间: 复性温度决定 PCR 的特异性,而引物退火温度和所需时间长短取决于反应体系中的基本组成及扩增引物的长度和浓度,实际使用

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专题封面
ELISA
专题79 内容  1167 订阅
测序反应实验
要得到合适的信号强度,可根据 DNA 片段的大小调节 DNA 的用量。适用于 ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 和 GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 热循环仪。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
RNA 标准转录反应
利用 DNA 聚合酶 I 的大片段(Klenow 酶)的 3'— 5'外切酶活性将 3'黏性末端转化成平末端。具体方法是在体外转录体系尚未加入核苷酸和 RNA 聚合酶时,加入 Klenoow 片段 (终浓度为 5U/ug),于 22℃ 孵育 15mim, 然后再加入核苷酸混合物和RNA 聚合酶
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
PCR 组装反应
)153.5ul H20 补至总体积 252ul2. 凝胶琼脂糖凝胶,1.4%3. 特殊设备PCR 仪PCR 管二、方法1. 向 3 个 PCR 管中都加入 10ul Rockstart 缓冲液和 10ul 35 mmol/L 的 MgCl2,让加入成分静置混合至少 15 min 以形成镁沉淀(BarnesandRowlyk2002)。2. 准备 three-reaction 主港合液。3. 在铁沉淀形成之后,向每个包括 Rockstart 沉淀的反应管中添加 80ul
操作方法所属实验:PCR 组装反应
溶血反应
溶菌反应只在某些细菌中出现(如霍乱弧菌)。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。溶血反应是由于抗原(红血球)和抗体(溶血素)进行特异性的结合,并吸着了补体,而使红血球在补体的作用下被溶解,于是产生了溶血现象。
操作方法所属实验:溶血反应实验
Eason老歌迷
看描述还是你提取的原始数据的问题
实验问答2 回答85 围观
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沉淀反应(Precipitation)实验

可溶性抗原与相应的抗体混合,在电解质存在的条件下,两者比例适合,即可有沉淀物出现,叫沉淀反应(Precipitation).由于沉淀反应抗原多系胶体溶液。沉淀物主要是由抗体蛋白所组成。 为了求得抗原与抗体的适宜比例,保证有足够的抗体,而且抗原分子小,具有较大的反应面积,因此操作上通常是稀释抗原,不稀释抗体。 沉淀反应的种类有环状沉淀、絮状沉淀、荚膜膨胀、琼脂扩散及免疫电泳等。此外还有放射性同位素标记、酶标

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基于基因芯片的酶反应方法

基于基因芯片的酶反应方法       在ASO的基础上,又衍生出了一些基于基因芯片的酶反应方法,用于SNP的分析。与直接杂交法不同的是,基于酶 学方法的基因多态性检测允许探针的3’端或近3’端设计突变碱基。一旦探针的3’端和靶基因序列互补,连接酶和多聚酶能够引导序列的延伸,这种特性可以用来区分不同靶基因的序列。这种方法被称为酶催化的延伸法,主要有引物延伸法和连接酶检测反应。基于这两种方法又发展了其他的基因芯片基因多态性检测手段,这里只介绍上述两种方法。     (1)引物延伸法

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希尔反应的观察实验
希尔反应(Hill  reaction)是绿色植物的离体叶绿体在光下分解水,放出氧气,同时还原电子受体的反应。氧化剂2,6-二氯酚靛酚是一种蓝色染料,接受电子和H+后被还原成无色,可以直接观察颜色的变化,也可用分光光度计,还可以对还原量进行精确测定。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
肥达反应实验
学习肥达反应的操作方法并初步掌握其结果分析。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
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