凝集反应实验

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

细菌细胞或红细胞等颗粒性抗原与特异性抗体结合后，在有电解质的情况下，会出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应，也叫直接凝集反应。凝集反应可说是经典的血淸学反应，使用历史长，并一直沿用至今，但技术方法有很大的发展与改进，例如，除直接凝集反应外，又有将可溶性抗原吸附到颗粒性载体（如红细胞、白陶土、离子交换树脂和火棉胶颗粒等）表面，然后再与相应抗体结合的间接凝集反应。用红细胞作为载体的间接凝集反应叫间接血凝试验，还有血凝抑制试验、反向间接血凝试验等。

来源：《微生物学实验（第三版）》

来源：丁香实验

操作方法

玻片凝集法

1. 在玻片的一端用滴瓶中的小滴管加一滴 1：10 大肠杆菌免疫血清，另一端加一滴生理盐水。2. 用接种环自大肠杆菌琼脂斜面上挑取少许细菌混入生理盐水内，并搅匀；同法挑取少许细菌混入血清内，搅匀。3. 将玻片略为摆动后静置室温中，1～3 分钟后即可观察到一端有凝集反应出现（图 1），另一端为生理盐水对照，仍为均匀混浊。图 1　玻片凝集试验A. 稀释抗血清+大肠杆菌（阳性反应）；B. 生理盐水+ 大

微量滴定凝集法

1. 稀释血清（两倍稀释）1.1 在微量滴定板上标记 10 个孔，从 1 至 10（如图 1）。图 1　抗血清稀释图1.2 用微量吸管（套上吸嘴）于第 1 孔中加 80 ul 生理盐水，其余各孔加 50 ul。1.3 加 20 ul 大肠杆菌抗血清于第 1 孔中。1.4 换一新的吸嘴，在第 1 孔中吸上、放下来回三次以充分混匀，再吸 50 ul 至第 2 孔。换吸嘴，同样在第 2 孔吸上、放下，三