细胞凝集反应实验
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1.实验目的
1.1 观察血细胞的凝集现象;
1.2 掌握凝集素促使细胞凝集的原理。
2.实验原理
凝集素(1ectin)是一类含糖的(少数凝集素例外)并能与糖进行专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂 的作用。凝集素促使细胞凝集主要是由于它能与细胞外被的糖分子相连接、在细胞间形成“桥”的结果,且加入与凝集素互补的糖分子可以抑制细胞间的凝集反应。
3.实验用品
3.1 器材
显微镜、托盘天平、载玻片若干、滴管2支、离心管2支。
3.2 试剂
PBS 缓冲液:称取NaCl 7.2g、NazHP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸馏水,定容至l000 mL,调pH值到7.2。
3.3实验材料
3.3.1. 土豆块茎。
3.3.2. 2% 红细胞悬液
以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),用生理盐水洗5次,每次2000 r/min,离心5 min,最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞悬液
4.实验方法
称取土豆去皮块茎2g
↓
加10 mL PBS缓冲液,浸泡2h(浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素)
↓
载玻片上滴一滴土豆凝集素
↓
再滴一滴2%红细胞液
↓充分混匀
静置20 min
↓
低倍显微镜下观察血球凝集现象
↓
以PBS液加2%血细胞悬液作为对照实验
5.实验结果
6.实验报告
(1).绘制简图,表示血细胞的凝集过程;
(2).图示血细胞凝集的原理。