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当已知蛋白结合的DNA序列的时候,可以使用PCR反应进行检测,PCR可以使用End point PCR和Q-PCR方法,在PCR的时候除了样本组外,还需要设置input 对照,阴性对照和空白对照。PCR扩增片段长度200-400bp最佳,模板DNA片段过长,结合位点的邻近DNA会出现一定程度的信号富集。 但是有些情况下,蛋白结合的DNA序列是未知的,这时我们需要使用ChIP结合测序(Seq)方法检测,染色质免疫共沉淀测序(ChIP-Seq)一般包括3个步骤:染色质免疫共沉淀(ChIP)反应,文库构建和测序。一般有两种方法操作,一种使用普通ChIP试剂盒,获得纯化的DNA,然后交个测序公司,由公司进行文库构建和测序。还有一种叫做ChIP-Seq试剂盒,这种试剂盒一般包括ChIP反应和文库构建,仅需将构建好的文库交给公司进行测序即可。
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