Chip 实验中，为什么input没有条带？ip跑出来位点不同？

如果input没有结果，先检查样本本身是否可信，PCR反应条件/体系是否正确；然后才能进一步分析

增加上样量呢，coip富集目的蛋白太多了 momo，还不行的话把input组的膜剪下来单独曝光。

原因可能有以下几点:

1. Input没有条带:

- Input DNA模板量太低,在PCR扩增过程中扩增不足以见到条带。可以适当提高Input DNA的模板量。

2. IP结果条带位置不一致:

- cDNA反转录时用的量不同,导致最终扩增产物量不同,条带位置不一样。应保证各样本cDNA反转录量一致。

- PCR扩增循环数不同,也会导致扩增产物量不同。应该对各样本进行同样的PCR循环数。

- 上样量不一致也可能导致条带移位。应精心吸取使各样本上样体积一致。

- 实验操作过程中样品之间出现交叉污染,也可能导致条带位置不一样。需注意试剂、管器之间的分开。

综上,对Input和IP样本,在反转录、PCR扩增和电泳上样等环节,操作要规范一致,才能保证结果可比性,避免条带位置 biased。