细胞凝集反应的实验原理和方法

实验原理

细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖等专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成桥的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

实验用品

　　1、土豆块茎。
　　2、显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。
　　3、PBS缓冲液
　　称取NaC 17.2g、Na2HP04 1.48g、KH2PO40.43g、加蒸馏水，定容至1000ml调pH值到7.2。
　　4、2％的红细胞。

以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂)，用生理盐水洗5次，每次2000r/min，离心5min，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。

实验方法

称取土豆去皮块茎2g，加10ml PBS缓液，漫泡2h，浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集索。

用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴，置载玻片上，充分混匀，静置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。

以PBS液加2%血细胞液作对照实验。