材料与仪器
步骤
1. 取干净凹窝塑料板一块,用蜡笔做好标记,用带有橡皮吸头的吸管,于第2 至第9 孔内各加人生理盐水0.2 mL;
2. 于第1 ,第2 及第9 孔中各加入稀释成1:5 的流感病人发病早期血清0.2 ml (血清处理见附录),混匀后,从第2 孔吸出0.2 ml 加入第3 孔,按同法稀释至第8 孔,吸出0.2 ml 弃去(血清稀释度分别为1:5~1:640)。
3. 在第1 至第8 孔中,各加入4血凝素单位流感病毒0.2 ml,第9 孔不加,作为血清对照。
4. 取同一病人的恢复期血病标本一份,按同法作红细胞凝集抑制试验。
5. 另取两孔,分别作病毒血凝素对照和红细胞对照。
第10 孔,病毒血凝素对照:盐水0.2 ml+ 4血凝素单位流感病毒0.2 ml。
第11 孔,红细胞对照:盐水0.4 ml。
6. 温静置10分钟后,于1~11孔中各加入1%鸡红细胞0.2 ml,摇匀。
结果观察:
最高血清稀释度能完全抑制红细胞凝集者为红细胞凝集抑制效价,比较早期,恢复期血清的血凝抑制抗体的效价,并作出判断。
2. 于第1 ,第2 及第9 孔中各加入稀释成1:5 的流感病人发病早期血清0.2 ml (血清处理见附录),混匀后,从第2 孔吸出0.2 ml 加入第3 孔,按同法稀释至第8 孔,吸出0.2 ml 弃去(血清稀释度分别为1:5~1:640)。
3. 在第1 至第8 孔中,各加入4血凝素单位流感病毒0.2 ml,第9 孔不加,作为血清对照。
4. 取同一病人的恢复期血病标本一份,按同法作红细胞凝集抑制试验。
5. 另取两孔,分别作病毒血凝素对照和红细胞对照。
第10 孔,病毒血凝素对照:盐水0.2 ml+ 4血凝素单位流感病毒0.2 ml。
第11 孔,红细胞对照:盐水0.4 ml。
6. 温静置10分钟后,于1~11孔中各加入1%鸡红细胞0.2 ml,摇匀。
结果观察:
最高血清稀释度能完全抑制红细胞凝集者为红细胞凝集抑制效价,比较早期,恢复期血清的血凝抑制抗体的效价,并作出判断。
注意事项
1. 发病早期,恢复期血清要同时做,以求条件一致。
2. 其他事项与红细胞凝集试验类同。
2. 其他事项与红细胞凝集试验类同。
来源:丁香实验