原理
玻片凝集法可利用已知抗血淸鉴定未知细菌,优点是极端快速,为诊断肠道传染病时鉴定病入标本中肠道细菌的重要手段。
血清学反应的基本组成成分除抗原与相对应的抗体外,尚需加入电解质(一般用生理盐水)。电解质的作用主要是消除抗原抗体结合物表面上的电荷,使其失去同电相斥的作用而转变为互相吸引,否则即使抗原与抗体发生结合亦不能聚合成明显的肉眼可见的反应物。
在一系列稀释的血清中(例如 1:5、1:10、1:20、1:40……),能与抗原发生明显凝集反应的最高稀释度的倒数,即为该免疫血清的效价。假如从 1:5 至 1:20 三个稀释度有凝集反应,1:40 的无凝集反应,則血清效价为 20。
材料与仪器
大肠杆菌琼脂斜面培养物
大肠杆菌免疫血清 生理盐水
玻片 接种环
大肠杆菌免疫血清 生理盐水
玻片 接种环
步骤
1. 在玻片的一端用滴瓶中的小滴管加一滴 1:10 大肠杆菌免疫血清,另一端加一滴生理盐水。
2. 用接种环自大肠杆菌琼脂斜面上挑取少许细菌混入生理盐水内,并搅匀;同法挑取少许细菌混入血清内,搅匀。
3. 将玻片略为摆动后静置室温中,1~3 分钟后即可观察到一端有凝集反应出现(图 1),另一端为生理盐水对照,仍为均匀混浊。
图 1 玻片凝集试验
A. 稀释抗血清+大肠杆菌(阳性反应);
B. 生理盐水+ 大肠杆菌(阴性反应)。
来源:丁香实验