RNA 标准转录反应

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

利用 DNA 聚合酶 I 的大片段（Klenow 酶）的 3＇— 5＇外切酶活性将 3＇黏性末端转化成平末端。具体方法是在体外转录体系尚未加入核苷酸和 RNA 聚合酶时，加入 Klenoow 片段 (终浓度为 5U/ug)，于 22℃ 孵育 15mim, 然后再加入核苷酸混合物和RNA 聚合酶

来源：丁香实验

操作方法

RNA 标准转录反应

一材料与设备 1) 限制性内切核酸酶 2) 模板 DNA 或质粒 3)TE 4)TE 饱和酚：氯仿 5) 氯仿：异丙醇 (24:1) 6)3mol/LNaAc(pH5.2) 7) 无水乙醇 8)5×转录缓冲液：200 mmol/LTris-HCl(PH7.9),300 mmol/LMgCl2,10 mmol/L 亚精胺，50 mmOl/LNaCl 9)l00 mmol/LDTT