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单亲二倍体的分子检测实验
单亲二倍体(UPD) 细胞可以有正常的细胞遗传核型但是亲代的贡献不平衡。诊断单亲二倍体需要分析患者和其父母的 DNA 标本基因型,如评估分子多态现象的遗传性。进行此方面的分析最常用微卫星分析,包括多态性短串联重复 (STR) 位点的 PCR 扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳,根据带型的大小加以区分。有时,单亲二倍体仅仅是「部分」的,也就是仅仅包括染色体的一个区域。这样就要求仔细选择分子标记以确保单亲二倍体区域不被漏检。对于一些染色体来说,父母双方同源基因甲基化的不同也可以用来筛查单亲二倍体。甲基化方法
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
染色体显微切割实验
切割和 FISH 技术所弥补。染色体显微切割已经成为由细胞遗传学分析快速过渡到分子检测的有力工具。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
单亲二倍体的分子检测
一、PCR 反应实验程序1.准备 PCR 反应混合物:根据 DNA 样本的数量来确定除了 DNA 外其他混合物的体积(额外增加一份来确保有足够的 PCR 反应混合物),将扩增每一个遗传标记并且在每一个 PCR 反应管内分 19.5uL 的反应混合物。2.在每个管子中加 0.5, 的 DNA 样本。3.如果不用带有加热盖的 PCR 仪,那么就需要在每个管子的顶部加入矿物油来防止液体蒸发。4.把管子放在 PCR 仪中,95℃加热 3 min 变性 DNA。5.95℃ 变性 40s、55℃ 引物
操作方法所属实验:单亲二倍体的分子检测实验
基因插入位点和模式
BAR、ALS 或 EPSP 等功能基因的转基因植株。而 β-葡萄糖醛酸酶基因、LUC 和绿色荧光蛋白基因等报告基因通常用于检测乃代植株的外源基因表达。无损伤表型鉴定,如观测绿色荧光蛋白基因或 LUC 的表达,优于有损伤表型鉴定,如葡萄糖醛酸酶基因染色或抗性检测,因为前者可用于外源基因未表达的代植株的后续分子检测。在事件 1 和事件 2 中,凡代转基因植株由 T。代植株自交获得,其 β-葡萄糖醛酸酶基因活性主要通过胚乳、叶片和根的组织化学染色方法测定。( 1 ) 胚乳染色时,种子先用 70% 的乙醇杀菌
操作方法所属实验:基因插入位点和模式实验
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【分享】Nanostring nCounter 荧光条形码标记单分子检测技术

N摘要:荧光条形码标记的单分子检测技术是一种全新的高通量检测基因表达谱、miRNA等分子的技术,其定量结果可与real-time PCR相媲美。由于它的高通量和高精确性填补了基因芯片和real-time PCR之间的技术空白,一经问世大受欢迎,其检测结果频频登载在nature、science、cell等顶级杂志上。NanoString公司研发的荧光条形码标记的单分子检测技术最早诞生于Leroy Hood博士创立的系统生物学研究所(Institute for Systems Biology

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效应细胞 CD107a 标记的流式细胞术检测法测定自然杀伤细胞活性
目前国内外多采用检测 NK 细胞活性来研究不同疾病状态下 NK 细胞功能。CD107a 是 NK 细胞脱颗粒的标志物,其表达水平与 NK 细胞的杀伤活性显著相关,因此 CD107a 分子检测可反映 NK 细胞活性。
操作方法所属实验:自然杀伤细胞活性测定
免疫印迹法测定细胞分泌蛋白质含量
免疫印迹法(immunoblotting)是对蛋白质混合溶液中目的蛋白进行定性的方法,也是对目的蛋白在不同细胞或者同一种细胞不同条件下的相对含量进行半定量的方法。印迹技术最初用于核酸分子检测,后来人们发现蛋白质在电泳分离之后也可以转移并固定于膜上,因此该方法也用于蛋白质的定性定量分析。相对应于分析 DNA 的 Southern 印迹和分析 RNA 的 Northern 印迹(见第六章),蛋白质印迹被称为 Western blotting。由于其利用的是抗原-抗体结合的方法检测目的
操作方法所属实验:细胞分泌蛋白质的含量测定实验
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【共享】Nanostring nCounter 荧光条形码标记单分子检测技术

摘要:荧光条形码标记的单分子检测技术是一种全新的高通量检测基因表达谱、miRNA等分子的技术,其定量结果可与real-time PCR相媲美。由于它的高通量和高精确性填补了基因芯片和real-time PCR之间的技术空白,一经问世大受欢迎,其检测结果频频登载在nature、science、cell等顶级杂志上。NanoString公司研发的荧光条形码标记的单分子检测技术最早诞生于Leroy Hood博士创立的系统生物学研究所(Institute for Systems Biology

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三色书虱体内wolbachia的分子检测

一、实验试剂 氯仿、异丙醇、无水乙醇、异戊醇、溴酚蓝、二甲苯氰FF、溴化乙锭、饱和酚(pH7.0 )、Taq DNA聚合酶、十二烷基肌氨酸钠、十二烷基硫酸钠、三轻甲基氨基甲烷、乙二氨四乙酸、饱和酚、100 bp Ladder DNA Marker 、琼脂糖。   二、实验设备 SW-CJ-CO净化工作台、FA1004A型电子天平、70型离子纯水器、SZ-93自动双重纯水蒸馏器、Mikro22R型高速冰冻离心机、 5415D台式

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免疫磁珠分选法
细胞进行干细胞相关和分化相关的分子检测。可采用免疫组化,流式细胞仪分析以及 RT-PCR 的手段进行研究。b. 体内移植实验:体内实验是对肿瘤干细胞自我更新与增殖分化能力的直接验证。将肿瘤干细胞注射到严重免疫缺陷的实验小鼠体内(例如一次性注射 100 个、200 个、500 个、1000 个细胞)观察其体内成瘤的情况和免疫组织化学检测,由此推断目的细胞形成肿瘤组织和增殖分化出不同成熟细胞的能力。肿瘤干细胞移植到 NOD/SCID 鼠内,可以在受体鼠内连续传代,分离出的肿瘤干细胞二次移植时仍能产生具有
操作方法所属实验:肿瘤干细胞的分离纯化
肠道感染病毒的分离鉴定
病毒分离是分子检测技术发明之前,用于EV检测的基本实验技术。大多数EV病毒可在多种人源或灵长类动物来源细胞系上进行增殖。但由于每种细胞系对不同EV的敏感性不同,没有任何一种细胞系可以用于分离所有型别的EV。 一般通过增加使用具有不同分离谱的细胞系种类,来增加分离EV的敏感性。最为常用的细胞系有:人横纹肌肉瘤细胞系(rhabdomyosarcoma,RD)、人喉癌上皮细胞系(human laryngeal epidermoid carcinoma,Hep-2)、 非洲绿猴肾细胞系(Vero
操作方法所属实验:肠道感染病毒及其检验
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细胞凋亡检测及相关分子检测

一、细胞 DNA 含量分布(由细胞 DNA 降解方式检测细胞凋亡) ① 收集已固定的单细胞悬液约 5×105~1×106/ml; ② 离心除去固定液,3ml PBS 重悬细胞; ③ 1500rpm 离心,5 分钟 ,弃去 PBS; ④ 加 PI 染液 1ml,室温避光 20 分钟; ⑤ 调整细胞浓度 5×105/ml; ⑥ 上机检测。 二、磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡 1. 常规制备单细胞悬液,用 PBS 洗两次。( 若为全血要先溶血),取约 5×

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qPCR 实验曲线有奖征集 (包邮送丁香园陶瓷杯)

PCR(聚合酶链式反应)是一种用于放大扩增特定的 DNA 片段的分子生物学技术,随着分子检测技术及各行各业的不断发展,qPCR 技术的应用也越加广泛,但想要获得完美的 PCR 曲线可不是一件容易的事。因此,罗氏面向广大站友发起一个有奖征集活动。参与规则:1. 上传你做过的漂亮 qPCR 实验曲线或者与罗氏 qPCR 相关产品合影。2. 拍摄 qPCR 实验小视频,可以是有趣的实验经过、娴熟的操作流程等,发送至邮箱 zhangwt@dxy.cn,并留下您的姓名、单位、联系方式和寄送地址。活动

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燕麦转基因及其在提高渗透胁迫耐受中的应用
剂处理后存活和死亡的植株数。( 4 ) 采用 X2 检验(53 ) 分析转基因在 R。、R1、R2 代的分离(表 10.2)。5. 转基因植株的分子检测(1) 聚合酶链反应(PCR)① 转基因植株中转基因的检测(如 bar 和 hav1) : 用叶片遵照 REDExtract- N-Amp  Plant  PCR试剂盒(Sigma- Aldrich, St.   Louis, MO, Cat#  XNA- P ) 的说明书操作提取 DNA。② 使用正向(F ) 和 反向(R ) PCR 引物
操作方法所属实验:燕麦转基因及其在提高渗透胁迫耐受中的应用实验
免疫印迹法分析测定细胞可溶性蛋白质含量
免疫印迹法(immunoblotting)是对蛋白质混合溶液中目的蛋白进行定性的方法,也是对目的蛋白在不同细胞或者同一种细胞不同条件下的相对含量进行半定量的方法。印迹技术最初用于核酸分子检测,后来人们发现蛋白质在电泳分离之后也可以转移并固定于膜上,因此该方法也用于蛋白质的定性定量分析。相对应于分析 DNA 的 Southern 印迹和分析 RNA 的 Northern 印迹(见第六章),蛋白质印迹被称为 Western blotting。由于其利用的是抗原-抗体结合的方法检测目的
操作方法所属实验:细胞可溶性蛋白质的含量测定实验
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学霸唠唠│小鼠实验,每组最少可以到几只?

、responsibilty),其中 reduction 减少实验动物的数量,前提是在统计学有效的情况下。3、在理论与实际之间的矛盾下,以及在许多文献的提示下,对每组选择动物的数量没有绝对的限制,但最终一定要避免个体差异而引起错误的实验结果。4、我的经验:一般检测组织或体液中的生化或分子指标时,建议每组动物数最好在 8 只~ 12 只或以上,如 MDA、GSH、ALT、NO,以及一些分子检测 RIA、ELISA。一般检测组织中基因或蛋白表达时,建议每组动物数量在 3~6 只或以上,如 RT-PCR、WB

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表面等离子共振技术(surface plasmon resonance technology, SPR)综述

相关专题   刘闯、魏巍、乔艳、苏瑞锐 摘要:SPR技术作为检测,分析生物分子 相互作用的有效工具,有些国家已经生产出成熟的商业化的SPR传感系统。对SPR生物传感器的工作原理,应用领域,最新进展作出阐述,并对其在生物分子检测领域的应用和研究发展前景进行了讨论。 引言:表面等离子共振技术(surface plasmon resonance technology, SPR)是20世纪90年代发展起来的一种生物分子检测

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