在近几十年中众所周知的是:在大部分人类肿瘤 和某些特定人类遗传病中存在染色体重排。肿瘤特定的染色体异常会导致原癌基因产物的激活、肿瘤特异融合蛋白的产生或肿瘤抑制基因的失活。自从染色体显带技术建立以来,肿瘤非随机性染色体异常的细胞遗传学分析已成为许多人类肿瘤诊断和预后不可或缺的指标 ,但常规显带染色体分析不能确定所有的细胞遗传学染色体重排(如复杂的染色体重排、小环状染色体和不能鉴别的新出现的非平衡性易位)。该技术的局限性阻碍了许多人类肿瘤,尤其是实体瘤核型的确定,但这种情况已被染色体显微切割和 FISH 技术所弥补。染色体显微切割已经成为由细胞遗传学分析快速过渡到分子检测的有力工具。
染色体显微切割
一、显微切割中期染色体的制备
1.取 0.5 mL 外周血与含 PHA 的 4.5 mL RPMI1640 培养液混合,在 37°C 培养细胞 64~68 h。
2.收获细胞前 20 min 在培养基中加入 25 ml 秋水仙胺(lO^g/mL),继续在 37°C 培养。
3.将细胞培养物移至 15 mL 离心管中 250 g 离心 5 min,然后小心弃上清。