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建立并保持雌激素受体(ER)低表达的乳腺癌类器官可以采用以下方法:
细胞培养条件优化
可以调整细胞培养基的成分、培养温度、CO2浓度等条件,以促进ER表达的下调。例如,可以采用低雌激素培养基、低温(33℃)培养等方法。
RNA干扰技术
可以通过RNA干扰技术抑制ER基因的表达,从而降低ER的表达水平。例如,可以采用siRNA、shRNA等技术。
药物处理
可以使用特定的化学药物抑制ER的表达。例如,可以使用嘌呤类似物(purine analogs)和苯并芘类似物(benzopyrene analogs)等药物。
CRISPR/Cas9基因编辑技术
可以利用CRISPR/Cas9基因编辑技术靶向编辑ER基因,实现ER的下调或者失活。
在保持ER低表达的乳腺癌类器官体外成瘤性方面,可以考虑使用ER阴性的乳腺癌细胞株进行体外成瘤实验。这些细胞株中ER表达极低或不表达,具有高度的浸润性和侵袭性,因此更符合ER低表达乳腺癌的临床特征。可以使用这些细胞株进行裸鼠体内异种移植实验,评估其体外成瘤性。
土井挞克树
可以诱导基因图片低表达的肿瘤细胞,然后挑选出低表达肿瘤细胞进行培养
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