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还在试抗体阶段,同一批样品之前都能跑出目的条带,最近两次跑出来的都是很弥散的条带,整个泳道都有蛋白。以为是一抗失效了,stripping后(图二)重新配一抗上抗体发现什么都没有了,请问大家可能是什么原因呢
南京中科世康生物
样本中不表达目标蛋白: 可能原因:样本类型选择不当或目标蛋白在特定条件下不表达。
解决方案:检查样本类型是否适合目标蛋白的表达,或者尝试改变实验条件以促进蛋白表达。
蛋白提取失败: 可能原因:提取方法不当、提取过程中蛋白降解、样品处理不当等。
解决方案:优化蛋白提取方法,如使用合适的裂解液、在提取过程中加入蛋白酶抑制剂、
保持低温操作等。 样本浓度过低: 可能原因:上样量不足或样本本身蛋白含量低。
解决方案:增加上样量、浓缩样本或使用更灵敏的检测方法。
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可能你的标本蛋白提取的不好,要么重新提取一批标本用新抗体试试;也有可能提蛋白的的试剂盒失效了;又或者蛋白含量太少
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