6孔板/12孔板转染48h后的细胞，消化下来重新计数铺至96孔板，24h后基线的OD450值总是差异比较大，如何解决？

同一组别的荧光值差别很大，是因为细胞凋亡脱落，孔里面的细胞分布不均匀。可以用高内涵细胞分析仪检测。

有以下几个可能的原因和解决方法：

1. 细胞密度差异：在将细胞从消化后重新计数铺至96孔板时，确保在不同孔中的细胞密度相似。使用精确的计数方法和合适的稀释液来确保细胞数量的准确性。如果细胞密度差异很大，可以重新铺板，以便细胞数量更加一致。

2. 细胞状态差异：细胞在转染和重新铺板的过程中可能会受到一些应激，导致细胞状态的差异。确保在转染和重新铺板的过程中采取标准化的操作步骤，尽量减少对细胞状态的影响。

3. 质量控制：对转染和重新铺板的实验进行质量控制。确保使用的试剂和培养基质量良好，并遵循实验室的标准操作规程。检查实验设备的性能，确保仪器的准确性和稳定性。

4. 统计分析：在数据分析时，使用适当的统计方法来比较不同组别之间的差异。确保样本数量足够，并考虑使用方差分析（ANOVA）或其他适合的统计方法来评估差异的显著性。

5. 重复实验：如果差异较大，可以考虑进行重复实验来验证结果。进行多次独立的实验可以提供更可靠的数据，并帮助确定差异的来源。

重新铺版后要重新计数，保证铺版的活细胞数量不要差太多