在养兔原代脂肪细胞，但是要么就是消化不下来，要么就是消化下来全是碎片，传代以后细胞形态也越来越差，怎么办？

建议你用含EDTA的胰酶，消化前用pbs冲洗细胞，也可直接用胰酶冲洗。加消化液后置培养箱。消化一段时间后仍然贴壁很稳的话可以重复上面的操作。

可能消化过度，建议消化处理时，在细胞将脱落而未脱落时弃去胰酶，然后加入新鲜培养基将细胞轻轻吹下来，再分到皿里

有几种可能的解决方案：

1. 培养基优化：尝试使用不同的培养基和培养条件，以找到最适合兔原代脂肪细胞生长和增殖的条件。不同的细胞类型可能对培养条件有不同的要求，因此通过尝试不同的培养基成分、添加物和pH值等因素来优化培养条件。

2. 传代技术改进：传代过程中细胞形态的恶化可能与细胞的老化或过度传代有关。尝试调整传代的时间和方法，以避免过度传代和老化。适当控制细胞的分裂次数，确保在细胞形态开始恶化之前进行传代。

3. 细胞减数分裂检测：检测您的细胞在培养过程中是否发生了减数分裂，即细胞染色体的异常分离和结构异常。这可能会导致细胞形态的恶化和碎片化。如果发现减数分裂的问题，可能需要重新评估您的细胞源或培养条件。

考虑是消化时间掌握的不对，如果细胞密度大的话要加长消化时间，密度小应该减少时间

根据你说的，并不是因为细胞有过度融合而消化不下来。细胞既然回缩，不再连成片，就表明细胞已经开始受到胰酶的影响，消化正在逐渐进行。

因为细胞本身的原因，它贴壁比较牢固，所以造成细胞难于消化，遇到这种情况，你大可以延长消化时间，你最好摸索一个最佳时间，对于难消化额细胞消化个半小时甚至到一小时是没有问题的，当然这是对于难消化细胞，贴壁异常牢固的细胞而言。

其次，建议你在进行消化时 首先把细胞培养瓶中的液体吸干净，然后吸入适量的胰酶，进行消化前的润洗，润洗后吸走，再加入消化量的胰酶进行消化，消化不下来的话可以延长消化时间。你需要摸索控制好时间。如果细胞成片被消化脱落的话，需要你进行吹打以吹散，必要时离心。

对于贴壁牢固的细胞，在玻璃瓶中传代培养会相对好消化一点，但是容易连成片，所以再你正式实验的前一次传代需要转回到塑料瓶里，消化下来的细胞都比较会是一个个的。