请问如何培养提纯原代胚胎干细胞并控制分化？

以下是关于将ESCs定向分化为胰腺或肾上腺干细胞的一些常见策略：

1. 培养条件调控：通过调整培养基中的成分和添加特定的生长因子和信号分子，可以促进ESCs向胰腺或肾上腺方向分化。这可能涉及到使用特定的细胞培养基和添加衍生自这些器官的因子，如Noggin、Activin、Wnt和Fgf等。

2. 时序诱导：根据发育的时序和信号梯度，逐步添加和去除不同的生长因子和分化因子，以模拟发育过程。这可以在特定时间点上启动和促进胰腺或肾上腺的分化。

3. 三维培养：使用三维细胞培养系统（如胚胎体外发育（EB）结构或组织工程支架），可以提供更接近原生发育环境的条件，从而促进胰腺或肾上腺分化。

至于腺细胞混合培养和transwell分离培养的选择，取决于你的研究目的和需要：

• 腺细胞混合培养：将定向分化的ESCs与目标细胞类型（例如胰腺或肾上腺细胞）一起培养，可以提供相互作用和细胞间信号传递的环境，可能促进更多的细胞发育和功能。

• Transwell分离培养：在Transwell插入物上培养定向分化的ESCs和目标细胞，可以实现细胞间的分离，同时通过共享培养基中的信号分子，模拟细胞间间接相互作用。这可以帮助研究细胞间的信号传导和相互影响，同时提供更精确的细胞分析。

最终的选择应该基于你的实验设计、研究目的和预期结果。建议参考相关文献和领域内的实验室经验，以了解最适合你研究问题的方法。

将含有新霉素抗性的人Ins基因插到具有潮霉素抗性的载体上，再将这个載体转入小鼠胚胎干细胞中，在低糖浓度下将它们诱导分化成了能分泌胰岛素的细胞并用潮霉素及新備素进行筛选。

用复杂的五步法将小鼠的胚胎干细胞诱导分化成了能分泌胰岛素的类似于胰岛的结构。先将小鼠的胚胎干细胞培养成类胚体，用ITSFn培养基培养使其产生巢蛋白阳性的细胞，并在此基础上诱导出了含有神经细胞及a、β等多种胰岛细胞的细胞群。

建议使用transwell分开培养，混合培养分化不可控