贴壁癌细胞胰酶消化过程中，几乎所有细胞都已变圆，也可以看到细胞脱落，但是用培养基中和后还是会发现很多变圆后的细胞贴壁消化不下来？

很可能是细胞发生了分化导致贴壁增强，可以试下消化能强的胰酶

培养基中细胞的消化要比贴壁细胞难消化，一般培养基消化除了胰酶浓度需要调高外，还要添加edta

建议：（1）胰酶和EDTA消化液水浴中预热到37℃，达到酶活力最适温度；

（2）消化细胞时，先到去旧培养基，用PBS洗1～2遍，去处血清，以免影响胰酶活性；

（3）加消化液后放置在培养箱中，一般3～5分钟，时间太久损伤细胞，原理同（1）；

（4）镜下观察，细胞伪足收缩，变圆，细胞间距离增大，用手拍打培养瓶再观察细胞分散悬浮后即可加少量含血清培养基终止消化。