细胞实验中，在培养基中加入HEPES有什么好处？

HEPES溶液是一种弱酸，主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此时可以维持pH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。

将HEPES添加到培养基中可以提供pH稳定性、防止CO2积累和维持离子平衡等优势，从而有助于细胞在培养过程中的正常生长和功能。在具体的实验条件下，根据细胞类型和研究需求，需要对HEPES的添加浓度和使用方法进行优化和调整。

HEPES缓冲液对细胞无毒性作用，它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。

1，HEPES在低温条件下作为酶的缓冲剂

通常生物缓冲剂的使用条件是室温25摄氏度，或者更高的温度（依据酶的最适pH范围），但有时候需要在低温条件下实验，有些缓冲剂受低温影响明显不宜使用。HEPES分解能力可随温度的升高而增强，随温度的降低而减弱，但与其他缓冲剂相比，它的分解常数随温度变化不大，这使HEPES缓冲液成为在低温时可较好地保持酶的结构和功能的缓冲剂。

2，HEPES对细胞无毒副作用

HEPES缓冲剂能较长时间控制恒定的pH范围，低浓度的HEPES对细胞无毒性作用，常用于细胞培养，比如各种细菌、真菌的培养液或病毒保存液中可以通过添加HEPES来维持细胞、细菌、病毒所需的pH环境。

缓冲细胞代谢引起的培养基pH值变化