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3H-TdR掺入法是用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DNA合成代谢过程,需要用到液体闪烁计数器,想问下为什么不用3H标记的腺嘌呤脱氧核苷酸来研究
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腺嘌呤脱氧核昔酸是非特异性核苷,在DNA和RNA中均存在,所以不能用于研究DNA合成。
loveliufudan
3H-TdR(氚标记的胸苷)被广泛用于研究DNA合成和细胞增殖,原因是胸苷(Thymidine)是构成DNA的四种核苷酸之一,它在RNA中不存在。这就使得胸苷的标记和检测成为了DNA合成的特异性指标。
相比之下,腺嘌呤脱氧核苷酸不仅在DNA中存在,也在RNA中存在。如果我们使用3H标记的腺嘌呤脱氧核苷酸,那么这个标记不仅会进入到DNA的合成中,也会进入到RNA的合成中。这样一来,我们就不能确保所有的标记都是源于DNA的合成,这就使得用这种方法测定DNA合成的数据可能会出现偏差。
所以,为了能够精确地测定DNA合成的活性,研究者们通常会选择用3H-TdR来进行实验。
土井挞克树
因为会引起非特异性结合,无法特异性显影
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