简介
荧光染料 CFSE，也称 CFDA SE（5，6-carboxyflu- orescein diacetate，succinimidyl ester）即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂，是一种可穿透细胞膜的荧光染料。
材料与仪器
仪器：流式细胞仪或荧光显微镜、离心机。
试剂：CFSE 试剂盒；灭菌纯水；细胞培养基；移液枪；枪头；15 ml 离心管。
步骤
1、根据试剂盒说明配制 CFDA SE 储存液和细胞标记液。
2、细胞正常培养及药物等处理后，收集细胞至 15 ml 离心管，用 1 ml CFDA SE 细胞标记液重悬细胞。
3、加入相应比例的 CFDA SE 储存液，轻轻混匀。
4、37 度孵育 10 分钟。
5、立即加入约 10 ml 细胞培养基，室温下轻轻颠倒混匀。
6、离心，去除上清液，加入 5 ml 细胞培养基洗涤一次。
7、离心后去上清，加入 5 ml 细胞培养基，37 度孵育 5 分钟。
8、再次离心，去上清。
9、加入细胞培养基重悬细胞，进行正常细胞的培养或处理等操作，后续可在荧光显微镜下直接观察细胞标记数目以反应细胞增殖情况，或用流式细胞仪检测细胞增殖情况。
注意事项
1、CFDA SE 的荧光近似于 FITC，外标抗体的荧光不能与之重叠。
2、试剂现用现配，如一次性配制，需注意使用时限。
3、荧光染料存在淬灭问题，实验操作尽量注意避光。
4、试剂盒内试剂若由沉淀，则需融解后再使用。
来源：丁香实验
