简介
5-溴-2'-脱氧尿嘧啶（5-bromo-2'-deoxyuridine， BrdU）是 DNA 前体胸腺嘧啶核苷类似物，通过竞争掺入 S 期细胞单链 DNA 核苷酸序列替代胸腺嘧啶。
近几年来，作为非放射性标记物，BrdU 可替代 H-TdR，避免了放射性污染问题，并同时具有敏感、简单和迅速的优点，因而用途十分广泛，对研究细胞动力学有重要意义，在肿瘤增殖细胞研究中有着特殊价值。
材料与仪器
器材：细胞培养箱、荧光化学发光分析仪。
试剂：
① BrdU 标记试剂。
② FixDenat 液。
③ Anti-BrdU-POD 反应液。
④ 抗体稀释液、洗涤液和底物等。
步骤
BrdU 检测法检测细胞增殖的基本过程可分为如下几步：
1、已接种到 96 孔板的细胞在相应抗原刺激 1—5 天后，加入 BrdU（10 μl/孔•100 μl 培养液），细胞培养箱中共同孵育 2—24 小时。
2、室温下，2000 r/min，15 分钟离心，除去培养液。
3、加入 200 μl/孔 FixDenat 液，室温，30 分钟固定细胞。尽量除尽固定液。
4、加入 100 μl/孔 Anti-BrdU-POD 反应液，室温放置 90 分钟。
5、200 — 300μl/孔专用洗净液洗板 3 次，加入 100 μl/孔底物溶液，室温反应 5 — 10 分钟，利用荧光化学发光分析仪，波长 450 — 655nm 处读取发光强度，结果用 Ascent 软件处理，采用 Student'st 检验，P＜0.05 示差异有统计学意义。
来源：丁香实验
