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贴壁细胞转染48h,细胞会死亡,导致细胞数量不一致,怎么办?

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贫道从来不吃素


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4 个回答

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汤姆卜丽波

有帮助

一般转染试剂都会对细胞造成伤害,你可以适当调整转染试剂的浓度和时间

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

最常见的原因就是转染剂浓度太高,建议降低转染剂浓度

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balalaLy

有帮助

如果是转染试剂太高,可以优化一下转染体系,如果是蛋白表达导致的细胞死亡,可以适当缩短一下转染时间

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loveliufudan

有帮助

如果在贴壁细胞转染后48小时发现细胞死亡并导致细胞数量不一致,可能有以下原因和解决办法:

1. 转染剂的浓度过高:转染剂(如DNA或siRNA转染试剂)的浓度过高可能对细胞产生毒性作用,导致细胞死亡。减少转染剂的浓度,尽量使用较低浓度的转染试剂。

2. 转染剂的选择:不同细胞类型对不同的转染试剂和方法的耐受性有所差异。尝试使用其他适合该细胞类型的转染试剂或方法,例如使用脂质体转染试剂或电穿孔等。

3. 转染时间的优化:转染后细胞需要一定的时间来适应和恢复,过长或过短的转染时间都可能导致细胞死亡。根据细胞类型和转染试剂的要求,优化转染时间,使其在合适的时间范围内。

4. 细胞密度的控制:细胞密度对转染后细胞的生存和恢复具有重要影响。确保在转染时细胞密度适中,不要过于稀疏或过于密集,这有助于维持适当的细胞生长条件。

5. 细胞培养基的优化:细胞培养基的成分和配方对细胞的生长和存活至关重要。确保使用适当的培养基,包括适当的营养物质、生长因子和补充物,以提供良好的生长环境。

6. 细胞质健康检查:在转染前和转染后观察细胞的形态和健康状态。如果细胞在转染前就存在问题,如感染、细胞凋亡等,转染后会更容易导致细胞死亡。在良好的细胞状态下进行转染。

7. 重复实验和统计分析:如果细胞数量不一致,可以进行多次独立的转染实验,并进行统计分析,以得到更准确和可靠的结果。

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