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丁香通

原代提取的细胞形态很奇怪 张牙舞爪是什么原因

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逆光99

最近在做小鼠背部毛囊里毛乳头细胞的原代提取 根据一篇用ficoll分层离心的方法提取了毛乳头并培养 下面是提取后第四天的细胞形态

刚提取出来的细胞贴壁生长(2d)后大概就由梭形(这时还能勉强看出成纤维细胞的形态 本来以为成功了)逐渐(3-4d)变成了现在的张牙舞爪的状态。

第一次提取出能培养的细胞形态,小鼠繁殖周期限制并不能一直提取,所以想向各位懂行的请教一下,希望能在下次提取过程中改进问题。

也在网上看了各种可能原因:1细胞老化(但是刚提取的细胞也会出现这样问题吗) 2支原体感染(不好排除 但是也是短时间就会影响细胞形态吗 如果存在下次争取加点清除剂进去)3细胞密度不够(并没有用流式等技术去定量 部分原因个人认为聚集团状的毛乳头不好去衡量里面细胞具体数量 但感觉密度上已经较之前做出了改进 并且部分皿里肉眼来看细胞数量尚可 可能细胞没贴壁有所影响也是可能的)

还是新手可能以上个人分析也很不成熟,希望能得到指教,哪一个方面层次的都需要各位前辈的经验 

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4 个回答

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skyye

有帮助

照片看细胞状态还可,但量比较少,张牙舞爪的可能是成纤维细胞吧,小的圆圆的比较像是你的目标一般。可能下次换个小的培养皿提取原代细胞比较好,细胞太少的话也会影响其生长。目前建议继续观察,多培养几天再看看

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麻黄连翘赤小豆

有帮助

看着像是营养不够,密度不够会造成细胞老化,这三个你这都有,但看着不像支原体污染

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可能是细胞老化导致的:原代细胞长满后,细胞会出现老化。因为原代细胞不是100%的细胞团,把混入的细胞控制在最小限度非常重要。建议细胞长到90-95%进行传代。

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balalaLy

有帮助

细胞状态还好,只是细胞太少太稀疏,建议消化下来换到小的培养皿中继续培养。

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