如何提取小鼠主动脉内皮细胞

组织贴壁法

将主动脉清理干净，纵向剪开，剪为小的片段，置于皿底，加入刚没过组织厚度的培养基进行培养，60h后有细胞游出

提取小鼠主动脉内皮细胞的一般步骤如下：

采集小鼠主动脉：

使用手术器械将小鼠杀死，取出主动脉并立即放入冰冻的PBS缓冲液中，以避免细胞坏死和凝固。

主动脉清洗：

将主动脉移至含有抗生素和抗菌素的PBS缓冲液中，用注射器将缓冲液反复灌入主动脉内，以彻底清洗掉血液和细胞碎片。

主动脉内皮细胞分离：

将清洗后的主动脉放入含有酶解液（如胰酶）的PBS缓冲液中，使之在37°C下消化30分钟，然后用琼脂糖分离液离心分离细胞。主动脉内皮细胞会黏附于培养皿内，其余细胞则会被分离出来。将非黏附细胞移除，留下黏附的主动脉内皮细胞。

主动脉内皮细胞培养：

将分离出的主动脉内皮细胞移至含有培养基的培养皿中，定期更换培养基，维持适宜的细胞生长条件。

需要注意的是，在进行主动脉内皮细胞提取实验前，需要做好实验前的准备工作，包括准备好所需的器材和试剂、制定详细的实验设计和操作步骤，以及了解相应的实验技术和安全操作规范。此外，实验过程中还需要注意保持操作环境的洁净和无菌，避免细菌和真菌的污染。

主动脉内皮细胞提取步骤：

1)取出正常成年小鼠主动脉组织;(2)超净工作台内,用注射器冲出多余脂肪;(3)密度梯度离心,吸取中间白膜层细胞;(4)离心,洗涤,用完全培养基重悬,接种培养瓶;(5)置于37℃,5%CO2培养箱培养;(6)诱导分化;(7)细胞形态观察与鉴定。