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想做水痘减毒活疫苗病毒裂解产物去刺激细胞,作细胞免疫水平的检测,怎么可以获得病毒 的裂解产物呢?用的裂解液是 Triton X-100 。
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增加裂解液Triton X-100 的浓度
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可通过煮沸法,离心柱提取法,磁珠法等方法来获取病毒的裂解产物。
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水痘减毒活疫苗的病毒裂解产物可以通过以下步骤获得:
1.制备疫苗裂解液:将水痘减毒活疫苗注射液加入含有0.1% Triton X-100的磷酸盐缓冲液中,摇晃轻轻混合,室温下放置30分钟使病毒彻底裂解。
2.离心:将混合液离心10-15分钟,以去除细胞碎片和其他杂质,收集上清液。
3.蛋白质浓度测定:使用蛋白质浓度检测试剂盒或其他蛋白质浓度检测方法,测定疫苗裂解液的蛋白质浓度。
4.制备稀释液:使用磷酸盐缓冲液或其他适合的缓冲液,将疫苗裂解液稀释至合适的浓度。
需要注意的是,在进行裂解产物的制备过程中,要避免过度离心或强烈震荡,以免破坏病毒抗原的结构。同时,使用 Triton X-100 时要小心操作,避免其接触到皮肤或吸入其气体,以免对健康产生危害。
此外,对于细胞免疫水平的检测,可以使用 ELISPOT、流式细胞术等方法来检测细胞因子的分泌水平,以评估细胞免疫水平的变化。
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