96孔板如何确定合适的细胞接种密度和药物干预时间?

确定适当的细胞接种密度和药物处理时间是细胞实验设计中非常重要的步骤。96孔板可以用来进行高通量筛选实验，其中可以同时测试多个样品以及不同处理条件下的细胞生长情况。以下是一些方法来确定适当的细胞接种密度和药物处理时间：

文献调研：在设计实验之前，可以查找类似实验的文献来获取参考信息。通过文献中的描述，可以了解到哪些细胞类型适合在96孔板上进行实验、推荐的接种密度和药物处理时间等信息。

实验前的预测试验：在进行正式实验之前，可以进行预测试验来确定适当的细胞接种密度和药物处理时间。对于细胞接种密度，可以尝试不同的密度，例如从1000个到5000个细胞每孔，以确定最佳的生长密度。对于药物处理时间，可以使用不同的时间点进行处理，例如1小时、3小时、6小时等，以确定细胞对药物的响应时间。

细胞生长曲线：可以在实验中测量细胞的生长曲线来确定最佳的药物处理时间。通过定期测量细胞的生长曲线，可以确定药物处理时间点，即在该时间点下细胞生长达到平衡状态。

经验法则：在缺乏文献参考或者没有时间进行预测试验的情况下，可以使用经验法则来确定最佳的细胞接种密度和药物处理时间。例如，对于细胞接种密度，可以使用一般规则，即每孔细胞密度为1万至5万个细胞。对于药物处理时间，可以根据药物类型和预期效果，使用通常时间范围作为初始参考值，并进行调整。

需要注意的是，每个实验的条件和情况都是不同的，因此最好结合文献调研、预测试验、细胞生长曲线和经验法则等方法来确定最佳的细胞接种密度和药物处理时间。

一般来说10的六-七次方左右的密度就可以

在96孔板中配置100μL的密度为2×104个/ml的细胞悬液。

一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。

一般是按照加药物干预时细胞密度在50%-60%