细胞接种密度
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问:最近的一个实验困扰我许久,就是关于给药剂量的问题,具体如下: 我在培养瓶中按undefined10E6密度观察了心肌细胞的搏动和药物的干预情况,接下来想做MTT,需要用96孔板做,是否还需要保持原来的密度,或可以降到undefined10E5呢,希望高手指点,
答:1.给药剂量需要预实验摸索,可以用6孔或24孔板实验,按照倍比或10倍浓度梯度设计不同剂量组,观察药物量效关系,最终再选择合适的浓度或更合理的浓度梯度进行下一步的实验。
2.药物实验中的细胞密度问题,一般需要考虑两方面因素:一是药物干预期间细胞数量适中,整体处于对数生长期;二是在实验结束前,细胞不能长过即防止进入平台期。
3.如果药物干预时间很短,如几分钟或几小时,只考虑细胞状态和合适的密度就可以了。比如你的预实验在培养瓶中按undefined10E6,效果比较理想,那么下一步的实验就应该按照这个密度。