xiaoyansun
不好意思,插个题外话,请问可以用其他细胞交换KPC细胞吗?或有偿提供?
晓雨知春来
同事做过,建议两种细胞混合共培养一段时间,使其充分融合再进行构建。
汤姆卜丽波
有同学做过,不过他是分不同区域种的,你可以先试试共培养,在接种
loveliufudan
有以下几点建议:
1.检查PSC细胞的活力、融合率是否正常,如果PSC细胞质量不好会导致不成功。
2.优化两种细胞的比例,KPC与PSC细胞1:1比例构建可能效果更好。
3.两种细胞混合共培养一段时间,使其充分融合再进行构建。
4.检测混合细胞里E-cadherin的表达,维持E-cadherin有助于细胞黏附定植。
5.梯度增大构建细胞数目,1x10^5、5x10^5、1x10^6等,找到最佳剂量。
6.为避免免疫排斥,使用免疫缺陷小鼠如NOD SCID小鼠。
7.可以添加一定的小鼠胰腺基质如胶原、纤维矿质化等辅助细胞定植。