miles0424
Ko是基因已经敲除了,FLOX是在基因两侧加位点,和特异性小鼠交配后并表达特意性蛋白后 ,将该基因敲除。
天赋训练
flox/flox小鼠与特定的cre小鼠交配,就可以得到ko小鼠,分为全身的和tissue-specific的。
MercyHuang
flox的意思是 flanked loxP,意思是在目的基因片段的两侧各放一个loxP位点。通常,这两个loxP位点同向排列,位于某一个外显子或者某几个连续的外显子两侧的内含子序列中。如此,由于mRNA成熟时拼接掉内含子,插入内含子中的loxP是不影响基因正常表达的。但是一但和携带Cre的小鼠品系交配,Cre蛋白表达的细胞中,Cre会识别两个loxP,并最终导致两个loxP位点之间的序列被删除。如果loxP之间的这1个或几个外显子对应mRNA上的非3的整数倍的碱基,删除后就会造成mRNA发生移码,导致基因功能丧失。哪些细胞哪些组织删除目标基因,取决于Cre在哪里表达,即取决于Cre放在了哪个基因的启动子后面。原理大致如此,具体问题具体分析。
dxy_gwrp7ndq
KO小鼠就是全身基因敲除小鼠,在小鼠的每个细胞里该基因都是被敲掉的,而flox小鼠也叫CKO小鼠,是条件性基因敲除小鼠,在目的敲除片段的首尾各插入一段loxp序列
府宅
KO小鼠是在需要敲除的片段两侧各放置一个loxp site,为了便于筛选。在其中一个loxp site旁边同时带上Neomycin标记,此标记两侧带有FRT位点(即FRT-Neo-FRT-loxp),这样的小鼠称为flox小鼠
whilt-shirt
flox/flox小鼠与特定的cre小鼠交配,就可以得到ko小鼠,分为全身的和tissue-specific的。
刘芷谷
flox/flox小鼠与floxed小鼠一样吗?flox/flox小鼠在需要敲除的片段两侧加了标记但还没与cre小鼠杂交的话,该片段还表达吗?
相关问答